Uso e Manutenção de Microscópio Biológico
Os microscópios biológicos são usados para observar e estudar fatias biológicas, células biológicas, bactérias e cultura de tecidos vivos, precipitação de fluidos, etc.
Pode observar outros objetos transparentes ou translúcidos, bem como pó, partículas finas e outros objetos. Hoje vamos falar sobre o uso e pós-produção de microscópios biológicos
O uso de um microscópio biológico
(1) Use ambiente e hábitos de trabalho
1. Use o ambiente
O local de trabalho do microscópio deve estar limpo, seco, livre de vibração e livre de gases corrosivos.
2. Hábitos de trabalho
(1) A altura da mesa e do banco deve ser adequada.
(2) Durante o exame microscópico, mesmo que seja usado um microscópio monocular, ambos os olhos devem ser abertos ao mesmo tempo, e o olho esquerdo deve ser observado. Para desenhar ou gravar com o olho direito. Se um olho estiver aberto e o outro fechado, os olhos estão propensos à fadiga e não podem ser observados por muito tempo. Ao trabalhar por muito tempo, você pode se revezar observando com os dois olhos.
(2) Preparação antes do uso
1. Instalação do sistema óptico
Para microscópios adquiridos recentemente ou cujo sistema óptico foi removido, o microscópio deve ser instalado antes do uso. Ao instalar, para evitar que a poeira caia, deve-se instalar primeiro para cima e depois para baixo, ou seja, de acordo com a ordem da ocular, lente objetiva, lente condensadora e refletor. A Figura 10-3-1 é o diagrama de instalação do microscópio. As setas mostram onde a ótica está montada.
Ao instalar a lente objetiva, o barril da lente deve ser levantado primeiro ou o estágio do transportador deve ser abaixado para manter uma certa distância entre o conversor e o estágio. Em seguida, segure a lente objetiva, coloque-a na porta do parafuso do conversor e gire-a levemente no sentido anti-horário. Depois que a lente objetiva estiver equipada com padrões de seda, aparafuse-a no sentido horário até que esteja moderadamente apertada. Ao instalar a lente objetiva, ela deve ser instalada no sentido horário de pequeno para grande de acordo com a ampliação da lente objetiva. Ao converter a lente objetiva, não empurre a lente objetiva para girar manualmente, caso contrário, o eixo óptico da lente objetiva ficará inclinado. É melhor segurar o disco giratório do conversor manualmente para girar, ou segurar o círculo externo serrilhado na junção com o conversor da lente objetiva manualmente para girar.
Depois que a ocular e a lente objetiva estiverem instaladas, insira o condensador no suporte do condensador sob a platina. A altura da inserção deve ser tal que, quando o condensador for elevado ao ponto mais alto, a face final da lente no condensador fique ligeiramente abaixo do plano da platina, de modo a evitar que a lâmina de vidro colida com a lente do condensador. Em seguida, aperte o parafuso de fixação do condensador. Para microscópios com fontes de luz não elétricas, o refletor é finalmente inserido no soquete sob o condensador.
2. Calibre o eixo óptico
O significado de corrigir o eixo óptico é fazer com que o eixo óptico principal da lente objetiva, ocular, condensador e o ponto central do diafragma variável coincidam em uma linha reta. Portanto, também é chamado de ajuste coaxial ou ajuste central. Se o eixo óptico estiver inclinado, a aberração aumentará e a resolução e a nitidez diminuirão.
O método de inspeção é abrir o diafragma variável ao máximo, aparafusar a lente objetiva de baixa ampliação no eixo óptico e abaixar o barril da lente para que a distância entre a lente objetiva e o palco seja menor que a distância de trabalho da objetiva lente (abaixo de 5mm). Sem colocar a amostra, ajuste o ângulo do refletor para tornar o campo de visão o mais claro; ou ajuste o brilho da lâmpada da fonte de luz para tornar o campo de visão adequado para claridade e escuridão.
Em seguida, desconecte a ocular e olhe diretamente através do tubo. Enquanto encolhe lentamente ou abre o diafragma variável várias vezes, quando o diafragma é fechado ao mínimo, a imagem do diafragma (apenas um pouco neste momento) deve cair apenas no centro da abertura da lente objetiva. Quando a abertura é aberta até certo ponto, a imagem da abertura deve coincidir com o círculo preto da abertura da lente objetiva. Se as duas condições acima forem atendidas, isso significa que eles são "coaxiais". Caso contrário, ajustes são necessários.
Tanto a ocular quanto a objetiva são fixas e não podem ser ajustadas. O ajuste coaxial é principalmente para ajustar a posição do condensador. Existem dois parafusos de correção do eixo óptico em ambos os lados do suporte do condensador de alguns microscópios, e o eixo pode ser alinhado ajustando esses dois parafusos. Outro tipo de concentrador é sustentado por três parafusos separados por 120 graus na estrutura, um dos quais é equipado com uma mola e pode ser esticado; os outros dois parafusos podem ser girados. Ajuste os dois parafusos para encaixar no eixo.
Depois que o eixo óptico do microscópio é calibrado, se o condensador não for removido ou outros motivos especiais, não é necessário calibrar com frequência.
3. Prepare a amostra
Prepare amostras de alta qualidade para uso posterior.
(3) Como usar refletores e condensadores e como alinhar a luz 1. Escurecimento
Para microscópios que usam espelhos, geralmente são usados espelhos planos para refletir a luz difusa do sol. Os refletores côncavos devem ser usados apenas com pouca luz ou quando houver distrações fora da janela.
Para microscópios que usam fontes de luz elétrica, basta ajustar o brilho adequadamente.
2. Uso do concentrador
(1) Ajuste da altura do condensador. No caso de irradiação de luz paralela, o foco do condensador geral é cerca de 1,25 mm acima do centro do plano da lente em sua extremidade superior. Ao usar uma lente de alta ampliação ou uma lente de óleo, devido à grande ampliação, o brilho da imagem espelhada é pequeno e é necessária uma iluminação forte. Portanto, o condensador deve ser elevado ao ponto mais alto para que o foco do condensador caia apenas no plano da amostra. Mas ao usar uma lente objetiva de baixa ampliação, o condensador pode ser abaixado adequadamente.
(2) Uso da abertura variável A abertura variável desempenha duas funções. Uma é controlar o fluxo luminoso direcionado ao corpo de prova; a outra é mudar a abertura numérica do condensador. Dos dois papéis, o último é dominante. Para aproveitar ao máximo a resolução da lente objetiva, em princípio, a abertura numérica do condensador deve ser a mesma da lente objetiva. Caso contrário, a resolução ou a clareza serão afetadas.
3. Método de iluminação
Para o microscópio de fonte de luz elétrica, ao usá-lo, basta ajustar a luz para o brilho adequado. Não é necessário apontar. No entanto, para microscópios de baixo custo que usam luz natural, para obter bons resultados de observação, a luz de iluminação deve ser totalmente utilizada. Portanto, a luz deve ser ajustada antes da inspeção do microscópio. Ao enfrentar a luz, gire a lente de baixa ampliação para o eixo óptico, levante o condensador adequadamente e abra o diafragma variável ao máximo. Em seguida, olhe pela ocular enquanto gira o espelho até que o campo de visão fique mais claro e claro. Se você usar luz natural, tente evitar a interferência de esquadrias e galhos de árvores fora da janela.
(4) Focalização correta da lente objetiva
Depois que a luz for concluída ou a luz apropriada for ajustada, levante o cilindro da lente ou abaixe a platina, prenda a lâmina da amostra no motor, ou seja, o suporte da amostra e mova a peça a ser inspecionada para o centro do orifício da luz do palco. Em seguida, comece a focar.
Não importa que tipo de inspeção seja feita, ela deve começar com uma lente de baixa potência. Ao focar, primeiro use o volante grosso para abaixar o cilindro da lente de modo que a distância entre a lente frontal do espelho de baixa ampliação e a tampa de vidro seja ligeiramente menor que a distância de trabalho da lente objetiva (abaixo de 5 mm). Para evitar que a lente objetiva pressione a lâmina da amostra, olhe pela lateral. Então, enquanto observa o campo de visão da ocular, use o volante grosso para levantar lentamente o corpo da lente. Depois de ver a imagem do objeto pela primeira vez, use o volante fino para ajustar o foco até que a imagem do objeto seja a mais nítida possível. O campo de visão da lente objetiva de baixa ampliação é grande, o que é propício para observar toda a imagem do espécime. Você também pode usar o motor ou ajustar o volante vertical e horizontalmente para encontrar o alvo observado. Se necessário, o alvo encontrado pode ser movido para o centro do campo de visão, pronto para observação com lentes de alta potência.
Ao converter de uma lente objetiva de baixa ampliação para uma lente objetiva de alta ampliação, se a lente objetiva for o equipamento original do microscópio e o vidro deslizante e a tampa de vidro usados atenderem aos padrões, a "conversão de altura igual" geralmente pode ser realizada . Ou seja, após a conversão, você pode ver uma imagem nítida, desde que ajuste levemente o botão de ajuste fino. Mas a lente de óleo não insiste na parfocalidade. É melhor levantar o barril da lente antes de trocar e, finalmente, focar novamente de acordo com o método de focagem da lente de baixa potência.
O método de uso da lente de óleo é o seguinte: primeiro levante o barril da lente, remova a lâmina da amostra, abaixe o condensador levemente e pingue duas gotas de óleo de cedro na lente do condensador (não deve haver bolhas de ar no óleo .Se houver, pode ser removido com uma pequena vara de madeira), em seguida, coloque a lâmina de amostra de volta à sua posição original e levante o condensador para que a superfície inferior da lâmina fique em contato com o óleo de cedro. Desta forma, a imersão em óleo do condensador é concluída. Em seguida, 1 gota de óleo de cedro foi colocada sobre a lamínula. Em seguida, espreite de lado e use o ajuste grosseiro para abaixar o barril da lente o máximo possível até que a lente frontal da lente de óleo esteja imersa em óleo de cedro (mas ainda não em contato com a lâmina de vidro), completando assim a imersão em óleo de a lente objetiva. Em seguida, enquanto observa pela ocular, use o microvolante para levantar lentamente o cilindro da lente (tenha cuidado para não torcer na direção errada e esmagar o vidro da tampa) até que a imagem do objeto mais nítida apareça no campo de visão.
A imersão em óleo do condensador também pode adotar outro método de gotejamento de óleo: ou seja, em vez de deixar cair o óleo diretamente na lente do condensador, vire a lâmina e solte o óleo na superfície inferior da lâmina e, em seguida, vire novamente, alinhe e coloque-o no concentrador e, em seguida, levante o concentrador para completar a imersão em óleo do concentrador. Embora esse método não seja tão suave, é mais seguro. Algumas pessoas usam um bastão de vidro para entrar em contato direto com o condensador para aplicar o óleo de cedro. Este método é fácil de arranhar a lente e não deve ser usado.
Ao usar uma lente de óleo, é permitido não adicionar óleo de cedro entre o condensador e a amostra, ou seja, o ar ainda é usado como meio no condensador, mas isso sacrificará a resolução da lente objetiva.
Se você precisar voltar para a lente objetiva de alta ampliação para observação depois de usar a lente de óleo, limpe o óleo na tampa de vidro para evitar a contaminação da lente objetiva de alta potência. No entanto, o óleo no concentrador não precisa ser limpo, desde que a abertura seja reduzida um pouco adequadamente.
Depois que a lente de óleo é usada, o óleo de cedro deve ser limpo a tempo. A lente pode ser limpa 1 ou 2 vezes com um papel de limpeza de lente limpo para remover a maior parte do óleo. Em seguida, limpe-o duas vezes com um lenço para lentes umedecido com xileno e, finalmente, limpe-o com um lenço para lentes. O método de limpeza do condensador é o mesmo. Se a amostra precisar ser preservada, o óleo de cedro na lâmina de vidro pode ser limpo "puxando o papel". Cubra a lâmina de vidro com papel para limpeza de lentes, pingue uma gota de xileno no papel, arraste a tira de papel enquanto estiver molhada e limpe-a várias vezes seguidas.
Por fim, ressalte: Durante todo o processo de focalização (especialmente a focalização de lentes objetivas de alta ampliação e lentes de óleo), cada movimento deve ser realizado lentamente. Caso contrário, a imagem do objeto piscará e o alvo de observação não poderá ser encontrado.
