WProwadzenie do zalet I Wad Wielofotonowej Mikroskopii Skaningowej laserowej
Vantagens do microscópio de varredura a laser multifóton:
1. Excluído pela luz vermelha ou infravermelha, a dispersão da luz é pequena e a dispersão de pequenas partículas é inversamente proporcional à quarta potência do comprimento de onda.
2. Fótons mais dispersos da seção transversal de imagem podem ser coletados sem a necessidade de furos.
3. Os poços não podem distinguir fótons dispersos emitidos de áreas desfocadas ou focais, e os multifotões têm melhor relação sinal-ruído em imagens profundas.
4. A luz ultravioleta ou visível usada para excitação de fóton única é facilmente absorvida e atenuada pela amostra antes que o feixe atinja o plano focal, dificultando a excitação de camadas profundas.
5. Em termos de observação da microscopia biológica, a primeira consideração é não danificar o estado ativo do próprio organismo, manter a circulação de água, concentração de íons, oxigênio e nutrientes. No campo da observação da luz, a energia térmica e de fótons deve permanecer dentro da dose de irradiação e energia luminosa que não danificam as células.
6. A microscopia multifotônica tem muitas vantagens. Em termos de resolução tridimensional, invasão de profundidade, eficiência de espalhamento, luz de fundo, relação sinal / ruído, controle etc., existem características que os microscópios a laser anteriores não possuem ou não podem superar
Desvantagens do microscópio de varredura a laser multifóton:
1. Somente para imagem de fluorescência.
2. Se a amostra incluir cromóforos que podem absorver a luz de excitação, a amostra poderá ser submetida a danos térmicos.
3. A resolução é ligeiramente reduzida, embora possa ser melhorada utilizando simultaneamente pequenos orifícios confocais, há perda de sinal.
4. Devido às limitações de lasers ultra -rápidos caros, o custo dos microscópios de varredura multifotão é relativamente alto.
