Qual é a diferença entre o microscópio de fluorescência e o microscópio invertido?
O microscópio é um instrumento importante na cultura de células e experimentos derivados relacionados. Atualmente, existem vários tipos de microscópios no mercado. É um desafio escolher um microscópio que atenda às suas necessidades e seja adequado. A seguir apresenta os princípios de microscópios invertidos e microscópios de fluorescência, para que você possa escolher facilmente.
A composição de um microscópio invertido é a mesma de um microscópio comum e inclui principalmente três partes: uma parte mecânica, uma parte de iluminação e uma parte óptica.
A composição de um microscópio invertido é a mesma de um microscópio vertical comum, exceto que a lente objetiva e o sistema de iluminação são invertidos, o primeiro está sob a platina e o último está acima da platina.
Essa estrutura permite que a distância efetiva entre o sistema concentrador de iluminação e a platina seja significativamente expandida, o que é conveniente para a colocação de objetos mais espessos a serem observados, como placas de Petri e frascos de cultura de células (claro, lâminas de vidro também são aceitáveis). A distância de trabalho entre eles não precisa ser muito grande.
O microscópio invertido é utilizado para a observação de microorganismos, células, bactérias, cultura de tecidos, suspensões, sedimentos, etc. em unidades médicas e de saúde, faculdades e universidades e institutos de pesquisa. Ele pode observar continuamente o processo de reprodução e divisão de células e bactérias no meio de cultura e pode fotografar qualquer forma desse processo.
É amplamente utilizado em citologia, parasitologia, oncologia, imunologia, engenharia genética, microbiologia industrial, botânica e outros campos.
A microscopia de fluorescência é usada para estudar a absorção, transporte, distribuição e localização de substâncias químicas nas células.
Para o objeto a ser inspecionado, existem duas formas de geração de fluorescência: a autofluorescência, que emite a fluorescência diretamente após a irradiação ultravioleta; fluorescência secundária, que pode emitir fluorescência após o objeto a ser observado ser tratado com corantes fluorescentes e então irradiado com luz ultravioleta.
Algumas substâncias nas células, como a clorofila, produzem autofluorescência após serem irradiadas por raios ultravioleta; algumas substâncias não podem fluorescer sozinhas, mas se forem coradas com corantes fluorescentes ou anticorpos fluorescentes, também podem emitir fluorescência secundária após serem irradiadas por raios ultravioleta.
O microscópio de fluorescência usa uma fonte de luz pontual com alta eficiência luminosa e emite luz de um determinado comprimento de onda (luz ultravioleta 365nm ou luz azul violeta 420nm) através do sistema de filtro de cor como luz de excitação, depois de excitar as substâncias fluorescentes no espécime para emitir várias cores de fluorescência e, em seguida, observe pela ampliação da objetiva e das oculares.
Sob forte contraste de fundo, mesmo que a fluorescência seja muito fraca, é fácil de identificar e possui alta sensibilidade. É usado principalmente para o estudo da estrutura e função celular e composição química.
