Quais são as diferenças entre um microscópio de contraste de fase e um microscópio normal?
O microscópio de contraste de fase é um microscópio especial que converte a diferença do caminho óptico (ou seja, diferença de fase) gerada pela luz que passa através dos detalhes transparentes da amostra em diferença de intensidade de luz.
Quando a luz passa através de uma amostra relativamente transparente, não há mudança significativa no comprimento de onda (cor) e na amplitude (brilho) da luz. Portanto, ao observar amostras não coradas (como células vivas) sob um microscópio óptico normal, sua morfologia e estrutura interna são frequentemente difíceis de distinguir. No entanto, devido às diferenças no índice de refração e na espessura de várias partes da célula, haverá diferenças no caminho óptico da luz direta e difratada quando a luz passa através deste tipo de amostra. À medida que o caminho óptico aumenta ou diminui, a fase das ondas de luz aceleradas ou atrasadas mudará (resultando em diferença de fase). A diferença de fase da luz não pode ser sentida a olho nu, mas um microscópio de contraste de fase pode usar seu dispositivo especial - uma abertura circular e uma placa de fase - para transformar a diferença de fase da luz em uma diferença de amplitude (diferença de brilho) que pode ser detectado pelo olho humano através do fenômeno de interferência da luz, fazendo com que objetos anteriormente transparentes exibam diferenças significativas de brilho e aumentem o contraste. Isso nos permite observar células vivas e certas estruturas finas dentro das células que não podem ser vistas ou claramente vistas sob luz óptica comum e escura microscópios de campo.
O princípio de imagem de um microscópio de contraste de fase: A fonte óptica só pode passar através de um anel transparente de abertura circular durante o exame microscópico e, depois de passar por um concentrador, ela se reúne em um feixe de luz. Quando esse feixe de luz passa pelo objeto que está sendo testado, ele sofre diversos graus de desvio (difração) devido aos diferentes caminhos ópticos de cada parte. Devido ao fato de a imagem formada pelo anel transparente coincidir com a superfície conjugada na placa de fase e o plano focal atrás da lente objetiva. Portanto, a luz direta que não se desviou passa pela superfície conjugada, enquanto a luz difratada que se desviou passa pela superfície compensadora. Devido às diferentes propriedades da superfície conjugada e da superfície de compensação na placa de fase, elas irão gerar respectivamente uma certa diferença de fase e redução de intensidade da luz que passa por essas duas partes. Os dois conjuntos de luz convergirão através da lente traseira e viajarão no mesmo caminho óptico, causando interferência entre a luz direta e difratada, transformando a diferença de fase em diferença de amplitude. Desta forma, durante o exame ao microscópio de contraste de fase, a luz de um corpo transparente incolor converte a diferença de fase que não pode ser resolvida pelo olho humano na diferença de amplitude (diferença de claro e escuro) que pode ser resolvida pelo olho humano.
