Três tipos de observação microscópica
I. Campo brilhante BF (campo brilhante BF)
BF de campo claro é uma forma familiar de microscopia, amplamente utilizada em patologia e testes para observação de seções coradas, e todos os microscópios são capazes de realizar esta função.
Campo brilhante
II. Campo escuro DF (campo escuro DF)
O campo escuro DF é, na verdade, iluminação de campo escuro. É diferente do campo claro porque não observa diretamente a luz iluminada, mas a luz refletida ou difratada do objeto que está sendo examinado. Como resultado, o campo de visão torna-se um fundo escuro, enquanto o objeto examinado aparece como uma imagem clara.
O princípio do campo de visão escuro é baseado no fenômeno Tyndall em óptica, poeira no caso de luz forte através da luz direta, o olho humano não pode ser observado, isto é por causa da luz forte ao redor da causa. Se a luz for direcionada obliquamente para ela, as partículas parecem aumentar de tamanho devido ao reflexo da luz e tornam-se visíveis ao olho humano.
Um acessório especial necessário para observação em campo escuro é uma luneta de campo escuro. Caracteriza-se por não permitir que o feixe de luz passe através do objeto examinado de baixo para cima, mas por alterar o caminho da luz de modo que ela seja direcionada obliquamente em direção ao objeto examinado, de modo que a luz iluminante não entre diretamente no lente objetiva, e uma imagem brilhante é formada usando a luz refletida ou difratada da superfície do objeto examinado. A resolução da observação em campo escuro é muito maior do que a observação em campo claro, * até 0.02-0.004
Campo escuro
III. Contraste de fase PH
No desenvolvimento da microscopia óptica, a invenção bem-sucedida do contraste de fase PH é uma conquista importante na moderna tecnologia de microscopia. Como sabemos, o olho humano só consegue distinguir o comprimento de onda (cor) e a amplitude (brilho) das ondas de luz, para espécimes biológicos incolores e brilhantes, quando a luz passa, o comprimento de onda e a amplitude não mudam muito, e é difícil para observar a amostra na observação de campo claro.
O microscópio de contraste de fase usa a diferença da faixa de luz do objeto examinado para exame microscópico, ou seja, usa efetivamente o fenômeno de interferência da luz para mudar a diferença de fase indistinguível do olho humano na diferença de amplitude distinguível, e até mesmo incolor e transparente substâncias podem tornar-se claramente visíveis. Isto facilita muito a observação de células vivas, de modo que a microscopia de contraste de fase é amplamente utilizada em microscópios invertidos.
O princípio básico da microscopia de contraste de fase é que a diferença na faixa óptica da luz visível transmitida através de uma amostra é transformada em uma diferença de amplitude, aumentando assim o contraste entre as várias estruturas e tornando-as visíveis. A luz é refratada através da amostra e se desvia do caminho original da luz, sendo atrasada em 1/4λ (comprimento de onda). Se 1/4λ for aumentado ou diminuído novamente, a diferença de alcance óptico torna-se 1/2λ, e a interferência entre os dois feixes de fotossíntese é reforçada após a interferência dos eixos dos dois feixes, e a amplitude aumenta ou diminui, assim melhorando o contraste. Na estrutura, o microscópio de contraste de fase possui duas características especiais que são diferentes do microscópio óptico comum:
1. O diafragma anular (diafragma anular) está localizado entre a fonte de luz e o condensador, a função é fazer a luz passar pelo condensador para formar um cone oco de luz, focando na amostra.
2. placa de fase (placa de fase anular) na lente objetiva revestida com placa de fase de fluoreto de magnésio, a luz direta ou difratada pode ser atrasada na fase 1/4λ. Existem dois tipos:
1. Uma placa de fase: a luz direta atrasada 1/4 λ, dois grupos de ondas de luz adição de ondas de luz coaxiais, aumento de amplitude, a estrutura da amostra do que o meio circundante é mais brilhante, a formação de contraste brilhante (ou contraste negativo) .
Placa de fase 2.B: a luz difratada é atrasada em 1/4 λ, os dois grupos de ondas de luz após a fusão do eixo da onda de luz são reduzidos, a amplitude torna-se menor, a formação de contraste escuro (ou contraste positivo ), a estrutura é mais escura que o meio circundante.
