A diferença entre microscopia de dois fótons e microscopia confocal a laser
O microscópio confocal a laser é um conjunto de sistemas de observação, análise e saída que usam o laser como fonte de luz, princípio e dispositivo de focagem conjugados com base no microscópio óptico tradicional e processamento digital de imagem do objeto observado usando um computador. Os principais sistemas incluem fontes de luz laser, microscópios automáticos, módulos de varredura (incluindo canais de caminho óptico confocal e furos, espelhos de varredura, detectores), processadores de sinal digital, computadores e dispositivos de saída de imagem (displays, impressoras coloridas). Usando um microscópio confocal de varredura a laser, é possível realizar tomografia e imagem da amostra observada. Portanto, é possível observar e analisar a estrutura espacial tridimensional das células sem danos.
Ao mesmo tempo, a microscopia confocal de varredura a laser também é uma ferramenta poderosa para observação dinâmica de células vivas, marcação de imunofluorescência múltipla e marcação de fluorescência iônica. Ele analisa com precisão a essência do espectro e distingue sinais de diferentes rótulos com espectros de emissão altamente sobrepostos.
O mais importante é que, para coloração fluorescente multicolorida, ela pode eliminar completamente a influência da diafonia de fluorescência, ao mesmo tempo que minimiza a perda do sinal de fluorescência da amostra. Tudo isso são coisas que os espelhos comuns não conseguem alcançar.
A relação de distância focal entre a objetiva do microscópio e a ocular
Princípios diferentes
1. Microscópio de fluorescência: utiliza luz ultravioleta como fonte de luz para iluminar o objeto que está sendo testado, fazendo com que ele emita fluorescência, e então observar a forma e posição do objeto sob o microscópio.
2. Microscópio confocal a laser: Com base na imagem de microscopia de fluorescência, um dispositivo de varredura a laser é instalado para excitar sondas de fluorescência usando luz ultravioleta ou visível.
Características diferentes
1. Microscópio de fluorescência: usado para estudar a absorção, transporte, distribuição e localização de substâncias dentro das células. Algumas substâncias nas células, como a clorofila, podem emitir fluorescência após serem expostas à radiação ultravioleta; Algumas substâncias em si podem não emitir fluorescência, mas se forem coradas com corantes fluorescentes ou anticorpos fluorescentes, também podem emitir fluorescência sob radiação ultravioleta.
2. Microscópio confocal a laser: uso de um computador para processamento de imagens para obter imagens fluorescentes da microestrutura interna de células ou tecidos e observar sinais fisiológicos como Ca2+, valor de pH, potencial de membrana e mudanças na morfologia celular no nível subcelular.
