A diferença entre microscopia óptica comum e microscopia de fluorescência
Microscópio óptico: É um instrumento óptico que utiliza princípios ópticos para ampliar e criar imagens de pequenos objetos que não podem ser distinguidos pelo olho humano, a fim de extrair informações microestruturais para as pessoas.
Microscópio fluorescente: O microscópio fluorescente usa luz ultravioleta como fonte de luz para iluminar o objeto que está sendo testado, fazendo com que ele emita fluorescência e, em seguida, observe a forma e a posição do objeto sob o microscópio. A microscopia de fluorescência é usada para estudar a absorção, transporte, distribuição e localização de substâncias intracelulares. Algumas substâncias nas células, como a clorofila, podem emitir fluorescência após serem expostas à radiação ultravioleta; Embora algumas substâncias por si só não possam emitir fluorescência, elas também podem emitir fluorescência após serem coradas com corantes fluorescentes ou anticorpos fluorescentes e irradiadas com luz ultravioleta. A microscopia de fluorescência é uma das ferramentas para pesquisas qualitativas e quantitativas sobre essas substâncias.
Um microscópio óptico geralmente consiste em uma platina, um sistema de iluminação por holofote, uma objetiva, uma ocular e um mecanismo de foco. O sistema de iluminação por holofotes pode obter diferentes métodos de observação, como pontos escuros em um fundo claro (conhecido como iluminação de campo claro) ou pontos brilhantes em um fundo escuro (conhecido como iluminação de campo escuro), alterando o método de iluminação, a fim de melhor descobrir e observar estruturas finas em diferentes situações.
A microscopia fluorescente e a microscopia comum têm as seguintes diferenças:
1. O método de iluminação é geralmente do tipo gota, onde a fonte de luz é projetada na amostra através da lente objetiva;
2. A fonte de luz é a luz ultravioleta, com comprimento de onda mais curto e resolução mais alta do que os microscópios comuns;
3. Existem dois filtros especiais, aquele na frente da fonte de luz é usado para filtrar a luz visível, e aquele entre a ocular e a lente objetiva é usado para filtrar a luz ultravioleta para proteger o olho humano.
A microscopia de fluorescência também é um tipo de microscópio óptico, sendo a principal diferença os diferentes comprimentos de onda de excitação entre os dois. Isso determina as diferenças na estrutura e no uso entre microscópios fluorescentes e microscópios ópticos comuns.
A microscopia de fluorescência é uma ferramenta fundamental para a citoquímica de imunofluorescência. É composto de componentes principais, como fonte de luz, sistema de placa de filtro e sistema óptico. É o uso de um determinado comprimento de onda de luz para excitar a amostra e emitir fluorescência, que é ampliada através de uma objetiva e sistema ocular para observar a imagem de fluorescência da amostra.
