Sete modos de observação do microscópio
A microscopia de campo claro é um método familiar de exame microscópico, amplamente utilizado em patologia, inspeção e observação de seções coradas. Todos os microscópios podem executar esta função.
2. Campo escuro DF
Darkfield é, na verdade, iluminação de campo escuro. Suas características são diferentes das do campo claro. Ele não observa diretamente a luz da iluminação, mas observa a luz refletida ou difratada pelo objeto sob inspeção. Assim, o campo de visão torna-se um fundo escuro, enquanto o objeto sob inspeção apresenta uma imagem clara.
O princípio do campo escuro é baseado no fenômeno de Tyndall em óptica. Quando a poeira é passada diretamente por luz forte, o olho humano não pode observá-la, o que é causado pela difração de luz forte. Se a luz for lançada obliquamente sobre ela, devido ao reflexo da luz, a partícula parece aumentar de tamanho e fica visível ao olho humano.
Um acessório especial necessário para observação de campo escuro é um condensador de campo escuro. Sua característica é que não permite que o feixe de luz atravesse o objeto de baixo para cima, mas muda o caminho da luz para que dispare obliquamente em direção ao objeto, para que a luz iluminante não entre diretamente na lente objetiva, e usa a luz de reflexão ou difração formada pela superfície do objeto Imagem brilhante. A resolução da observação de campo escuro é muito maior do que a da observação de campo claro, até {{0}},02—0,004
3. Contraste de fase PH
Durante o desenvolvimento de microscópios ópticos, a invenção bem-sucedida da microscopia de contraste de fase é uma conquista importante na tecnologia de microscopia moderna. Sabemos que o olho humano só consegue distinguir o comprimento de onda (cor) e a amplitude (brilho) das ondas de luz. Para espécimes biológicos incolores e transparentes, quando a luz passa, o comprimento de onda e a amplitude mudam pouco, e é difícil observar o espécime na observação de campo claro. .
O microscópio de contraste de fase usa a diferença de caminho óptico do objeto a ser inspecionado, ou seja, usa efetivamente o fenômeno de interferência da luz para mudar a diferença de fase que não pode ser resolvida pelo olho humano em uma diferença de amplitude resolvível, mesmo para incolor e transparente substâncias. tornar-se claramente visível. Isso facilita muito a observação de células vivas, de modo que a microscopia de contraste de fase é amplamente utilizada em microscópios invertidos.
O princípio básico do microscópio de contraste de fase é alterar a diferença do caminho óptico da luz visível que passa pela amostra em uma diferença de amplitude, melhorando assim o contraste entre várias estruturas e tornando várias estruturas claramente visíveis. A luz é refratada após passar pela amostra, desvia do caminho óptico original e é atrasada em 1/4λ (comprimento de onda) ao mesmo tempo. Se for aumentado ou diminuído em 1/4λ, a diferença do caminho óptico torna-se 1/2λ e os dois feixes interferem após o eixo óptico Fortalecer, aumentar ou diminuir a amplitude, melhorar o contraste. Em termos de estrutura, os microscópios de contraste de fase têm duas características especiais diferentes dos microscópios ópticos comuns:
1. O diafragma anular está localizado entre a fonte de luz e o condensador, e sua função é fazer com que a luz que passa pelo condensador forme um cone de luz oco e focalize-o na amostra.
2. Placa de fase anular Uma placa de fase revestida com fluoreto de magnésio é adicionada à lente objetiva, o que pode atrasar a fase da luz direta ou da luz difratada em 1/4λ. Dividido em dois tipos:
Uma placa de fase: Atrase a luz direta em 1/4λ, adicione as ondas de luz após os dois grupos de ondas de luz se combinarem e aumente a amplitude, a estrutura da amostra é mais brilhante que o meio circundante, formando um contraste brilhante (ou contraste negativo) .
Placa de fase B: Atrase a luz difratada em 1/4λ, as ondas de luz dos dois grupos de luz são subtraídas após o alinhamento do eixo e a amplitude torna-se menor, formando um contraste escuro (ou contraste positivo) e a estrutura é mais escuro que o meio circundante
Quatro. DIC de contraste de interferência diferencial
A microscopia de interferência diferencial apareceu na década de 1960. Ele pode não apenas observar objetos incolores e transparentes, mas também mostrar uma sensação tridimensional de relevo e tem algumas vantagens que a microscopia de contraste de fase não pode alcançar. O efeito de observação é ainda melhor. realista.
princípio;
A interferência diferencial chamada microscopia é o uso de um prisma Wollaston especial para dividir o feixe de luz. As direções de vibração dos feixes divididos são perpendiculares entre si e a intensidade é igual, e os feixes passam pelo objeto em dois pontos muito próximos um do outro, e há uma pequena diferença de fase. Como a distância dividida entre os dois feixes de luz é extremamente pequena, não há fenômeno de imagem dupla, de modo que a imagem apresenta uma sensação tridimensional tridimensional.
