Métodos de preparação de amostras para microscopia óptica e eletrônica de filmes
O método de microfilmagem geralmente inclui quatro categorias: método de corte, método de vedação geral, método de revestimento e método de prensagem.
①Método de fatia. Espessura da fatia do microscópio óptico entre 2 a 25 mícrons, materiais vegetais e animais em geral, a fatia tem cerca de 10 mícrons de espessura é apropriada. O método de seccionamento varia de acordo com os diferentes agentes de incorporação. Comumente usados são o método de seccionamento em parafina, o método de seccionamento com cola de algodão, o método de seccionamento congelado e o método de metacrilato de glicol (referido como método GMA). O método de seccionamento em parafina inclui as etapas de fixação, inclusão, seccionamento, coloração, desidratação e selagem. O segredo é incorporar o biomaterial na parafina e usar a parafina como suporte para cortar o biomaterial imerso no bloco de cera em fatias finas ideais. O processo de operação é o seguinte: fixação → lavagem com água → passo a passo de desidratação de álcool de baixa a alta concentração → transparência de xileno → imersão em cera → incorporação → seccionamento → patching → desparafinação de xileno → passo a passo de alta para baixa concentração tratamento com álcool e, finalmente, transição para água → coloração → passo a passo da desidratação com álcool de baixa para alta concentração → transparência de xileno → selagem com adesivo de resina. As etapas básicas envolvidas são as mesmas em todos os tipos de técnicas de produção cinematográfica.
② Método de vedação integral. Usado para células individuais, organismos minúsculos ou órgãos dispersos de todo o método de filme montado. Este método também requer várias etapas de fixação, coloração, desidratação, transparência e selagem. Este método é utilizado para a preparação do aparelho bucal de crisopídeos e insetos.
Método de esfregaço. Método de preparação no qual uma amostra biológica facilmente dispersável é revestida em uma lâmina. O esfregaço de sangue é um exemplo.
④Método de pressão. Os tecidos naturais, facilmente dispersos ou tecidos facilmente dispersos após o tratamento, como espermatócitos animais, células da ponta da raiz, etc. na lâmina, além de uma lamela, e depois esmagar com força os tecidos, de modo que as células ou estruturas intracelulares se espalhem em uma camada de métodos de filmagem. O método de impressão é frequentemente usado para observar cromossomos, geralmente corados com acetato magenta, vermelho líquen e vermelho ácido carbólico.
