Medição do volume do bloco de tecido usando microscópios biológicos
Até o momento, a criofixação, o corte ultra{0}}fino congelado e a liofilização-são métodos de rotina para microscopia de raios X-de tecidos e células. Forneça os seguintes detalhes sobre este método:
Um microscópio biológico com holofote pode mover o holofote para cima e para baixo para obter brilho moderado, e a abertura da abertura variável também pode ser alterada para obter brilho moderado. Se a luz vier do sol, o holofote pode ser elevado adequadamente e a abertura da luz variável pode ser ampliada adequadamente. Se a luz for muito forte, o holofote pode ser abaixado adequadamente e a abertura da interseção pode ser reduzida adequadamente. Se você ainda se sente deslumbrado nesta situação, pode optar por colocar um filtro apropriado no suporte sob o holofote. Este carvalho pode atingir um brilho que o satisfaça. É claro que ajustar as posições superior e inferior do holofote pode alterar o tamanho da abertura da leitura da luz e selecionar filtros adequados, o que requer um certo período de prática e experiência.
Uma questão muito importante na microscopia biológica é o processo de amostragem e isolamento de células. Após a liofilização-e a incorporação de resina (FD), as seções ultra-finas congeladas devem ser cuidadosamente processadas para garantir que o conteúdo de 65 elementos de cada peça não seja danificado durante a observação e análise. Devido às inúmeras etapas e ao alto custo envolvido na microanálise de-raios X, é lamentável tirar conclusões incorretas se as células analisadas estiverem danificadas ou mortas após processamento prolongado-de várias etapas. As células miocárdicas separadas pelo tratamento com gelatinase têm duas formas, uma em forma de bastão longo e a outra circular. Este último refere-se a células mortas que são danificadas durante o processo de separação celular.
O conteúdo e a distribuição de eletrólitos nesses dois tipos de células são muito diferentes sob um microscópio biológico. O Na é muito alto e o K é extremamente baixo nos cardiomiócitos circulares, e a concentração de Ca nos dendritos lineares é muito alta. Após verificação com outros métodos analíticos, foi comprovado que o alto Na e o baixo K nas células circulares e o alto Ca nas mitocôndrias são o resultado de danos na membrana durante a separação celular. O método de fixação a frio para células e tecidos geralmente envolve primeiro a têmpera e depois o armazenamento em nitrogênio líquido. A fixação de têmpera é crucial para o efeito de preservação. Células vivas ou tecidos frescos são ricos em água e, quando resfriados, as partes das células ou tecidos que entram em contato direto com o refrigerante (especialmente quando se utiliza nitrogênio líquido para resfriamento) são frequentemente congeladas e fixadas primeiro, formando uma "concha" que impede que a parte central das células seja esmagada e fixada. Portanto, ao realizar microanálises de raios X, muitas vezes descobre-se que existem cristais de gelo na parte central de células maiores. Para evitar que esta situação aconteça, uma substância com ponto de fusão superior ao do nitrogênio líquido, mas inferior em 806c, é usada como refrigerante. Existem muitas dessas substâncias, mas são fáceis de obter e o mais acessível é o propano concentrado (ponto de ebulição 42,120c, ponto de fusão 187,10c, peso molecular 44,1), que também possui uma taxa de resfriamento rápida. Mas a desvantagem é que é inflamável.
