Como ajustar a intensidade do laser de um microscópio confocal de varredura a laser
Existem dois fatores de ajuste para a intensidade do laser: botão de controle de potência e filtro acústico-óptico sintonizável (AOTF)
1. Botão de controle de potência: Geralmente definido para 30% do valor máximo. Aumentar a saída reduzirá a vida útil do laser e gerará ruído de laser. AOTF, PMT, etc. devem ser ajustados primeiro para obter a melhor intensidade.
2. Filtro acústico óptico sintonizável: controla o feixe de luz de excitação e a intensidade e pode ligar ou desligar o laser ou ajustá-lo entre 0-100% em milissegundos. Isto permite a utilização de diferentes feixes de laser para cada ponto da imagem e a seleção da intensidade necessária.
Princípio de funcionamento: Utiliza o efeito de difração de Bragg de ondas sonoras que se propagam em vários meios na difração de Bragg incidente no meio de propagação. Quando uma certa frequência de sinal de RF é recebida, o AOTF difrata a luz policromática incidente e seleciona a luz monocromática com o comprimento de onda da entrada. O comprimento de onda da luz monocromática corresponde um-a-um com a frequência de RF f. Contanto que o sinal elétrico esteja sintonizado, o comprimento de onda de saída pode ser alterado de forma rápida e aleatória. AOTF alcança ajuste contínuo da intensidade do laser e possui função de ajuste rápido, realizando estimulação e varredura local, troca rápida de comprimento de onda (nível de microssegundos). Na microscopia confocal a laser, os tubos fotomultiplicadores não podem aumentar a intensidade do laser, mas podem ajustar a intensidade da luz pós-imagem. Portanto, ajustando a tensão do tubo fotomultiplicador, o brilho da imagem pode ser ajustado. Além disso, o tamanho do furo focal afeta a quantidade de fótons e também pode ajustar o brilho da imagem. Um tubo fotomultiplicador é um tubo de vácuo especial extremamente sensível à luz ultravioleta, visível e-infravermelha próxima. Ele pode aumentar o sinal de luz fraco recebido em 108 vezes, permitindo que o sinal de luz seja medido.
