Dicas e truques para microscópio de fluorescência
(i) Apresentações
A espessura da lâmina deve ficar entre 0 0,8 e 1,2 mm, declives muito grossos, por um lado, maior absorção de luz, por outro lado, não conseguem fazer a excitação da luz na amostra coletada. A lâmina deve ser lisa, de espessura uniforme e sem autofluorescência óbvia. Às vezes, são necessárias lâminas de vidro de quartzo.
(ii) Lamelas
Espessura da lamínula de cerca de 00,17 mm, limpa. A fim de aumentar a luz de excitação, também pode ser usado para interferir na lamela, que é uma superfície especial revestida com uma série de camadas de diferentes comprimentos de onda de luz que desempenham um papel diferente na interferência de substâncias (como fluoreto de magnésio) de a lamela, que pode fazer a fluorescência através da excitação suave e reflexiva da luz, a excitação refletida da luz pode ser a excitação da mulher da amostra.
(iii) espécimes
Seções de tecido ou outras amostras não podem ser muito espessas, como a luz de excitação muito espessa é consumida principalmente na parte inferior da amostra, e a lente objetiva observada diretamente na parte superior da excitação insuficiente. Além disso, sobreposição celular ou mascaramento de impurezas, afetando o julgamento.
(D) agente selante
Agente de vedação comumente usado glicerol, deve estar livre de autofluorescência, incolor e transparente, o brilho da fluorescência em pH 8,5 ~ 9,5 é mais brilhante, não é fácil de desaparecer rapidamente. Portanto, glicerina comumente usada e 0,5mol/lpH9.0 ~ 9,5 de tampão carbonato igual quantidade de mistura para agente de vedação.
(E) óleo de espelho
Microscópio geral de fluorescência de campo escuro e observação de amostras de espelho de óleo, deve usar óleo de espelho, de preferência usando óleo de espelho não fluorescente especial, também pode ser usado no lugar do glicerol acima mencionado, parafina líquida também pode ser usada, mas o índice de refração inferior, afetando ligeiramente a qualidade da imagem.
