Requisitos de preparação de amostras para microscópio de fluorescência
(i) Apresentações
A espessura da lâmina deve ficar entre 0 0,8 e 1,2 mm, declives muito grossos, por um lado, maior absorção de luz, por outro lado, não conseguem fazer a excitação da luz na amostra coletada. A lâmina deve ser lisa, de espessura uniforme e sem autofluorescência óbvia. Às vezes é necessário usar lâminas de vidro de quartzo.
(ii) lamela
As lamelas têm cerca de 00,17 mm de espessura e são lisas. A fim de aumentar a luz de excitação, também pode ser usada para interferir na lamela, esta é uma superfície especial revestida com uma série de camadas de diferentes comprimentos de onda de luz que desempenham um papel diferente na interferência de substâncias (como fluoreto de magnésio) de a lamela, que pode fazer a fluorescência através do liso e refletir a excitação da luz, o reflexo da excitação da luz feminina pode ser a excitação da amostra.
(C) espécimes
Seções de tecido ou outras amostras não podem ser muito espessas, como a luz de excitação muito espessa é consumida principalmente na parte inferior da amostra, e a lente objetiva observada diretamente na parte superior da excitação insuficiente. Além disso, há sobreposição de células ou impurezas mascaradas, afetando o julgamento.
(D) agente selante
Agente de vedação glicerol comumente usado, não deve ter autofluorescência, incolor e transparente, o brilho da fluorescência em pH 8,5 ~ 9,5 quando mais brilhante, não é fácil de desbotar rapidamente. Portanto, glicerina comumente usada e 00,5 mol / l pH9.0 ~ 9,5 do tampão carbonato igual quantidade de mistura para o selante.
(E) óleo de espelho
Microscópio geral de fluorescência de campo escuro e observação de amostra de espelho de óleo, deve usar óleo de espelho, * bom uso de óleo de espelho não fluorescente especial, também pode ser usado no lugar do glicerol acima, parafina líquida também pode ser usada, mas o índice de refração é menor , a qualidade da imagem é ligeiramente afetada.
