Procedimento experimental para método de contagem direta por microscopia microbiológica
1. Diluição
Suspensão de Saccharomyces cerevisiae para diluição adequada, o líquido bacteriano, como não espesso, não pode ser diluído.
2. Inspeção espelhada da câmara de contagem
Antes de adicionar amostras, a câmara de contagem da placa de contagem deve ser inspecionada primeiro. Se houver sujeira, ela deverá ser limpa antes da contagem.
3. Adição de amostra
Placa de hematócrito limpa e seca coberta com uma lamela e, em seguida, uma bureta asséptica de boca fina será diluída com líquido de levedura de cerveja da borda da lamela (não deve ser muito), de modo que o líquido bacteriano ao longo da lacuna por infiltração capilar em a câmara de contagem, a câmara de contagem geral pode ser preenchida com líquido bacteriano. Observe que não deve haver bolhas de ar.
4. Contagem de microscópio
Depois de descansar por 5 minutos, coloque a placa de contagem de sangue no suporte do microscópio, primeiro encontre a localização da câmara de contagem com baixa ampliação e depois mude para alta ampliação para contagem. Se o fluido bacteriano for muito espesso ou muito fino antes da contagem, a diluição precisa ser reajustada antes da contagem. Geralmente, a diluição da amostra requer cerca de 5-10 organismos em cada célula pequena. Para cada câmara de contagem, são contados os organismos nos 5 compartimentos intermediários (podem ser selecionados 4 cantos e o centro do compartimento intermediário). As bactérias localizadas nas linhas da grade geralmente são contadas apenas nas linhas superior e direita. No caso de brotamento de levedura, dois organismos são contados se o corpo em brotamento tiver metade do tamanho da célula-mãe. Contar uma amostra das duas câmaras de contagem para contar o valor para calcular o conteúdo bacteriano da amostra.
5. Limpeza da placa de hematócrito
Após o uso, a placa de contagem de células sanguíneas na gaiola de água com enxágue de coluna de água, não use objetos duros para lavar e escovar, lavar e secar ou secar com secador de cabelo. Inspecione microscopicamente a placa e observe se há algum organismo residual ou outros precipitados em cada pequeno compartimento. Caso não esteja limpo, a lavagem deve ser repetida até que esteja limpo.
