Diferença entre microscópio óptico comum e microscópio baseado em fluorescência
Microscópio óptico: É um instrumento óptico que utiliza princípios ópticos para ampliar e criar imagens de pequenos objetos que não podem ser distinguidos pelo olho humano, para que as pessoas possam extrair informações estruturais detalhadas.
Microscópio de fluorescência: Um microscópio de fluorescência usa luz ultravioleta como fonte de luz para iluminar o objeto que está sendo inspecionado para fazê-lo emitir fluorescência e, em seguida, observar a forma e a localização do objeto sob o microscópio. A microscopia de fluorescência é utilizada para estudar a absorção e transporte de substâncias dentro das células, bem como a distribuição e posicionamento de substâncias químicas. Algumas substâncias nas células, como a clorofila, podem apresentar fluorescência após serem irradiadas por raios ultravioleta; algumas substâncias em si não podem apresentar fluorescência, mas se forem coradas com corantes fluorescentes ou anticorpos fluorescentes, podem apresentar fluorescência após irradiação com raios ultravioleta. A microscopia de fluorescência é uma das ferramentas para pesquisas qualitativas e quantitativas sobre tais substâncias.
Os microscópios ópticos geralmente consistem em uma platina, um sistema de iluminação por holofotes, uma lente objetiva, uma ocular e um mecanismo de foco. Ao alterar o método de iluminação, o sistema de iluminação do refletor pode obter diferentes métodos de observação, como pontos de objetos escuros em um fundo claro (chamado de iluminação de campo claro) ou pontos de objetos brilhantes em um fundo escuro (chamado de iluminação de campo escuro), para que possa ser usado em diferentes situações. para melhor descobrir e observar estruturas finas.
As diferenças entre o microscópio de fluorescência e o microscópio comum são as seguintes:
1. O método de iluminação geralmente é a epi-iluminação, ou seja, a fonte de luz é projetada na amostra através da lente objetiva;
2. A fonte de luz é a luz ultravioleta, com comprimento de onda mais curto e maior resolução do que os microscópios comuns;
3. Existem dois filtros especiais, aquele na frente da fonte de luz é usado para filtrar a luz visível, e aquele entre a ocular e a lente objetiva é usado para filtrar os raios ultravioleta para proteger os olhos humanos.
A microscopia de fluorescência também é um tipo de microscópio óptico. A principal diferença são os diferentes comprimentos de onda de excitação. Isso determina as diferenças na estrutura e no uso entre microscópios de fluorescência e microscópios ópticos comuns.
A microscopia de fluorescência é uma ferramenta essencial na citoquímica de imunofluorescência. É composto por componentes principais como fonte de luz, sistema de placa de filtro e sistema óptico. Ele usa luz de um determinado comprimento de onda para excitar a amostra e emitir fluorescência e, em seguida, amplia a imagem fluorescente da amostra através da lente objetiva e do sistema ocular.
