Vantagens e desvantagens da microscopia de varredura a laser multifótonada explicada
As vantagens são as seguintes:
1. Excluído pela luz vermelha ou infravermelha, a dispersão da luz é pequena (a dispersão de pequenas partículas é inversamente proporcional à quarta potência do comprimento de onda).
2. Não há necessidade de furos, capaz de coletar fótons mais dispersos da seção transversal de imagem.
3. Os poços não podem distinguir fótons dispersos emitidos de áreas desfocadas ou focais, e os multifotões têm melhor relação sinal-ruído em imagens profundas.
4. A luz ultravioleta ou visível usada para excitação de fóton única é facilmente absorvida e atenuada pela amostra antes que o feixe atinja o plano focal, dificultando a excitação de camadas profundas.
5. Em termos de observação da microscopia biológica, a primeira consideração é não danificar o estado ativo do próprio organismo e manter a circulação de água, concentração de íons, oxigênio e nutrientes. No campo da observação da luz, a energia térmica e de fótons deve permanecer dentro da dose de irradiação e energia luminosa que não danificam as células.
6. A microscopia multifotônica também tem muitas vantagens. Em termos de resolução tridimensional, invasão de profundidade, eficiência de espalhamento, luz de fundo, relação sinal / ruído, controle etc., os microscópios a laser têm características incomparáveis ou superiores que os microscopos a laser anteriores não possuíam.
Multiphoton confocal laser scanning microscopy has been extended to various research and application fields, It can perform three-dimensional non-destructive observation on samples in their natural state and improve the resolution and signal-to-noise ratio of the system By utilizing the changes in material properties after multiphoton excitation, three-dimensional height data storage and three-dimensional microfabrication in any direction can also be achieved, which has high application Valor, pode -se acreditar que, com o desenvolvimento adicional de tecnologias mecânicas, materiais e a laser relacionadas à microscopia confocal multifocal, microscopia de varredura confocal a laser multifocal terá maior desenvolvimento e aplicações mais amplas
As desvantagens são as seguintes:
1. Somente para imagem de fluorescência.
2. Se a amostra incluir cromóforos que podem absorver a luz de excitação, como pigmentos, a amostra pode ser submetida a danos térmicos.
3. A resolução é ligeiramente reduzida, embora possa ser melhorada utilizando simultaneamente pequenos orifícios confocais, haverá perda de sinal.
4. Devido às limitações de lasers ultra -rápidos caros, o custo dos microscópios de varredura multifotão é relativamente alto.
