Existem dois tipos de microscópios de fluorescência em relação ao seu caminho óptico:
1. Microscópio de fluorescência de transmissão: a fonte de luz de excitação passa pelo espelho condensador através do material da amostra para estimular a fluorescência. Coletor de campo escuro comumente usado, também pode ser usado coletor comum, ajuste o refletor para que a luz de excitação seja transmitida e desviada para a amostra. Este é o tipo mais antigo de microscópio de fluorescência. A vantagem é que a fluorescência é forte em baixa ampliação, e a desvantagem é que a fluorescência é enfraquecida com o aumento da ampliação. Portanto, é melhor observar o material da amostra maior.
2. Microscópio de fluorescência tipo queda este é um novo tipo de microscópio de fluorescência desenvolvido nos últimos tempos, e a diferença é que a excitação da luz da lente objetiva até a superfície da amostra, ou seja, a mesma lente objetiva que a iluminação do concentrador e a coleta de lentes objetivas de fluorescência. O caminho óptico precisa ser adicionado a um separador de feixe de duas cores, que tem um ângulo de 45. com a luz do urânio, a luz de excitação é refletida na lente objetiva e coletada na amostra, a fluorescência produzida pela amostra e pela objetiva superfície da lente da lente, cubra a reflexão da superfície de vidro da luz de excitação na lente objetiva ao mesmo tempo e de volta ao separador de feixe de duas cores, de modo que a luz de excitação e a fluorescência sejam separadas da luz de excitação residual e então sejam absorvidas por os filtros de bloqueio. Se você alterar os diferentes filtros de excitação / separador de feixe de duas cores / bloco de combinação de filtro de bloqueio, poderá atender às necessidades de diferentes produtos de reação de fluorescência. As vantagens deste microscópio de fluorescência são o campo de visão de iluminação uniforme, imagem nítida, quanto maior a ampliação da fluorescência, mais forte.
(B) método de microscópio de fluorescência.
1. Abra a fonte de luz, lâmpada de mercúrio de ultra-alta pressão para pré-aquecer por alguns minutos para atingir o ponto mais brilhante.
2. O microscópio de fluorescência de transmissão precisa ser instalado entre a fonte de luz e o concentrador necessário para estimular o filtro, na parte traseira da lente objetiva com o filtro de bloqueio correspondente. O microscópio de fluorescência descendente precisa ser inserido na ranhura do caminho óptico do filtro de excitação / separador de feixe de duas cores / insertos de filtro de bloqueio necessários.
3. Observe com lente de baixa ampliação e ajuste o centro da fonte de luz para que fique localizada no centro de todo o ponto de iluminação de acordo com o dispositivo de ajuste de diferentes modelos de microscópios de fluorescência.
4. Coloque a fatia da amostra, a focagem pode ser observada. O uso deve prestar atenção: ao final da instalação dos filtros não use o olho para observar diretamente, para não causar danos aos olhos; com espelho de óleo para observar a amostra, deve-se usar um espelho de óleo especial não fluorescente; a lâmpada de mercúrio de alta pressão não pode ser reaberta imediatamente após o fechamento da lâmpada, você precisa de 5 minutos antes de poder começar novamente, caso contrário ela ficará instável, afetando a vida útil da lâmpada de mercúrio.
(C) observação Sob o microscópio de fluorescência na fase de ensino com um filtro de luz azul-violeta, células coradas com 0,01% de corante fluorescente laranja amidina podem ser vistas, e o núcleo e o citoplasma das células são excitados para produzir dois diferentes cores de fluorescência (verde escuro e vermelho alaranjado).
