Por que a ampliação de uma lente de óleo é maior do que a de uma lente objetiva comum?
Razões pelas quais as bactérias precisam ser corrigidas antes da coloração em experimentos microbiológicos:
1: Mate as células e torne o corante fácil de colorir.
Dois: Faça com que as bactérias adiram à lâmina de vidro e não sejam facilmente removidas pela água.
Ao fixar, seque lentamente. Se você realmente deseja acelerar o processo, pode secá-lo algumas vezes à distância, acima da chama de uma lamparina a álcool. Não seque o vidro para que aqueça, caso contrário poderá destruir a forma de vida bacteriana.
Coloração de Gram e observação microscópica de bactérias
Princípio experimental
Princípio da coloração de Gram: As diferentes reações das bactérias à coloração de Gram são devidas à diferente composição e estrutura de suas paredes celulares. A parede celular das bactérias Gram-positivas é principalmente uma rede de peptidoglicanos. Quando tratado com etanol, o tamanho dos poros da estrutura da rede torna-se menor devido à desidratação, e a permeabilidade diminui, causando assim a formação do complexo de cristal violeta-iodo. A substância não é facilmente eluída e permanece nas células. Após a descoloração e a contracoloração, a cor azul-púrpura do corante primário ainda é retida. A camada de peptidoglicano da parede celular das bactérias Gram-negativas é fina e possui alto teor lipídico. Portanto, durante a descoloração, os lipídios são dissolvidos pelo etanol (ou acetona), e a permeabilidade da parede celular aumenta, tornando o complexo cristal violeta-iodo relativamente fácil de ser eluído. Após a contracoloração com contracorante, as células são coradas com a cor vermelha do contracorante. Princípio da imagem microscópica: Os microscópios ópticos comuns modernos usam dois sistemas de lentes, oculares e lentes objetivas, para ampliar imagens, por isso são frequentemente chamados de microscópios compostos. No sistema óptico de um microscópio, o desempenho da lente objetiva é o mais crítico. A lente de óleo tem a maior ampliação e é a mais importante para a pesquisa microbiológica. O principal objetivo de adicionar gotas de óleo para lentes entre a lâmina e a lente é aumentar o brilho da iluminação e aumentar a resolução do microscópio. Usar óleo em vez de ar como meio de propagação da luz reduz a refração ou reflexão total da luz, tornando a imagem observada mais nítida.
Procure as colônias bacterianas a serem observadas em um microscópio de baixa ampliação (continue movendo a lâmina, se sentir uma sombra vermelha, pare imediatamente, ajuste a ampliação, se não for uma colônia, continue olhando), levante o cano da lente e depois mude para a lente de óleo. Adicione uma gota de óleo de cedro à área da amostra e use o ajustador grosso para abaixar cuidadosamente o cilindro da lente de modo que a lente de óleo fique imersa no óleo da lente e quase em contato com a amostra. Levante o condensador até a posição mais alta e abra a abertura. Use o ajuste grosso para levantar lentamente o cilindro da lente até que a imagem do objeto apareça no campo de visão e use o ajuste fino para torná-la nítida e focada.
