Que tipo de microscópio é usado para ver a forma das células microbianas
Um termo coletivo para todos os organismos minúsculos que são difíceis para os indivíduos observarem a olho nu. Os microrganismos incluem bactérias, vírus, fungos e algumas algas. (No entanto, alguns microrganismos são visíveis a olho nu, como cogumelos pertencentes a fungos, Ganoderma lucidum, etc.) Os vírus são um tipo de "organismos não celulares" compostos por alguns componentes, como ácidos nucléicos e proteínas, mas seus a sobrevivência deve depender de células vivas. De acordo com os diferentes ambientes existentes, eles podem ser divididos em microrganismos procarióticos, microrganismos espaciais, microrganismos fúngicos, microrganismos leveduriformes, microrganismos marinhos, etc.
O papel e os danos dos microrganismos:
Um dos impactos mais importantes dos microrganismos nos seres humanos é a prevalência de doenças infecciosas. 50% das doenças humanas são causadas por vírus. A história dos micróbios que causam doenças humanas é a história da luta constante dos seres humanos contra eles. Os seres humanos têm feito grandes progressos na prevenção e tratamento de doenças, mas infecções microbianas novas e recorrentes continuam a ocorrer, como um grande número de doenças virais que carecem de drogas terapêuticas eficazes. O mecanismo patogênico de algumas doenças não é claro. O abuso de um grande número de antibióticos de amplo espectro causou forte pressão de seleção, fazendo com que muitas cepas sofressem mutações, levando ao surgimento de resistência aos medicamentos, e a saúde humana é ameaçada por novas ameaças. Alguns vírus segmentados podem sofrer mutações por recombinação ou rearranjo. O exemplo mais típico é o vírus influenza.
Depois de conhecer a definição específica de microorganismos, que tipo de microscópio o experimentador deve usar ao estudar microorganismos para ver e qual microscópio pode ser usado para ver melhor e observar e analisar formas microbianas comuns.
A invenção do microscópio é poder ver objetos sorridentes que não podem ser vistos a olho nu. O tamanho dos microrganismos é muito pequeno, por isso devem ser ampliados e observados com o auxílio de um microscópio. Além disso, existem muitos tipos de microorganismos, então basicamente a maioria dos microscópios ópticos pode Para observar microorganismos, a próxima pergunta é que tipo de microscópio deve ser usado para observação e análise de microorganismos. Os microscópios comuns para observação da morfologia microbiana incluem microscópios biológicos, microscópios de contraste de fase, microscópios invertidos, microscópios de fluorescência e microscópios confocais. Microscópio e assim por diante.
O seguinte descreve os vários microscópios usados para observar microorganismos:
1. Microscópio de luz comum
A luz natural ou luz é usada como fonte de luz e seu comprimento de onda é de cerca de {{0}},4 μm. A resolução do microscópio é metade do comprimento de onda, ou seja, 0,2 μm, e a menor imagem visível a olho nu é 0,2 mm. Portanto, usar um espelho de óleo (de imersão) para ampliar 1000 vezes pode ampliar as partículas de 0,2 μm em 0,2 mm visíveis a olho nu. Microscópios ópticos comuns podem ser usados para a observação de bactérias, actinomicetos e fungos.
2. A microscopia de campo escuro é comumente usada para observar a morfologia e o movimento microbiano não corado. Depois que o condensador de campo escuro é instalado no microscópio comum, a luz não pode penetrar diretamente do meio e o campo de visão fica escuro. Quando a amostra recebe luz oblíqua da borda do condensador, ela pode ser espalhada, de modo que microrganismos brilhantes possam ser observados no fundo do campo escuro, como bactérias ou espiroquetas.
3. Microscópio de contraste de fase O microscópio de contraste de fase usa o efeito de luz da placa de diferença de fase para alterar a fase de luz e a amplitude da luz direta e converter a diferença de fase de luz em diferença de intensidade de luz. Sob um microscópio de contraste de fase, quando a luz passa por uma amostra não corada, a diferença na fase da luz é causada pela inconsistência da densidade de diferentes partes da amostra, e a morfologia, estrutura interna e modo de movimento dos microorganismos podem ser observados.
4. Microscópio de fluorescência O microscópio de fluorescência é basicamente o mesmo que o microscópio óptico comum, a principal diferença é a fonte de luz, filtro e condensador. Atualmente, a maioria deles usa dispositivos de epi-luz, e lâmpadas de mercúrio de alta pressão são comumente usadas como fontes de luz, que podem emitir luz ultravioleta ou azul-violeta. Existem dois tipos de filtros: filtro de excitação e filtro de absorção. Além dos condensadores gerais de campo claro, os condensadores de campo escuro também podem ser usados em microscópios de fluorescência usando luz azul para aumentar o contraste entre a fluorescência e o fundo. Este método é aplicável à detecção ou identificação de bactérias coradas com pigmentos fluorescentes ou combinadas com anticorpos fluorescentes.
5. Os microscópios eletrônicos usam o fluxo de elétrons como fonte de luz. Comparado com a luz visível, o comprimento de onda é dezenas de milhares de vezes diferente, o que melhora muito a resolução. A bobina magnética é usada como sistema de amplificação óptica, e a ampliação pode chegar a dezenas de milhares ou centenas de milhares de vezes. É freqüentemente usado em partículas de vírus. e a observação da ultraestrutura bacteriana.
Observação de amostras microbianas não coradas:
As amostras não coradas geralmente podem ser usadas para observar a morfologia, poder e movimento bacteriano. As bactérias são incolores e transparentes quando não coradas e são observadas ao microscópio principalmente pela diferença entre o índice de refração das bactérias e o ambiente circundante. Bactérias com flagelos movem-se vigorosamente, enquanto bactérias sem flagelos apresentam movimento browniano irregular. Bactérias viáveis como Treponema pallidum, Leptospira e Campylobacter têm formas distintas e padrões de movimento, que são de importância diagnóstica. Os métodos comumente usados são o método de queda de pressão, o método de gota pendente e o método capilar.
1. Método da gota suspensa Aplique vaselina ao redor do orifício côncavo da lâmina de vidro côncava limpa, pegue um anel de suspensão bacteriana com uma alça de inoculação e coloque-o no centro da tampa de vidro, depois alinhe o orifício côncavo da lâmina de vidro côncava com coloque a gota no centro da lamínula e coloque a lamínula, depois vire-a rapidamente, pressione levemente a lamínula para que ela grude bem na vaselina na borda do orifício côncavo, e então observe sob uma grande potência microscópio (ou campo escuro).
2. Pegue um anel de suspensão bacteriana com uma alça de inoculação e coloque-o no centro de uma lâmina de vidro limpa pelo método de queda de pressão e cubra suavemente a suspensão bacteriana com uma lamínula, tomando cuidado para evitar a geração de bolhas de ar e evitar a suspensão bacteriana de transbordar. Observação de campo claro (ou campo escuro) sob uma lente de alta potência.
3. O método capilar é usado principalmente para o exame da cinética de bactérias anaeróbicas. Normalmente escolha 60~70mm de comprimento. Após sifonar a suspensão de bactérias anaeróbias através de um capilar com abertura de 0,5-1,0 mm, selar as duas extremidades do capilar com chama. O capilar foi fixado na lâmina de vidro com papel plástico e observado sob lente de alta potência em campo escuro.
Observação de espécimes microbianos corados com um microscópio:
Após a coloração da amostra bacteriana, devido ao nítido contraste de cor entre as bactérias e o ambiente circundante, as características morfológicas das bactérias (como tamanho, forma, disposição, etc.) das bactérias e algumas estruturas especiais podem ser claramente observados em um microscópio óptico comum (como cápsulas, flagelos, esporos, etc.), e as bactérias podem ser classificadas e identificadas de acordo com a reatividade da coloração.
(1) Procedimento geral de coloração bacteriana O procedimento geral de coloração bacteriana é: esfregaço (secagem)—fixação—coloração.
1. Esfregaço Preparação de sangue, secreções, excreções, fluido de punção e cultura líquida e esfregaço de filme fino direto em lâminas de vidro; autópsia ou tecidos animais infectados, esfregue a lesão com um cotonete para amostragem. Para a preparação de colônias bacterianas ou gramados em meio sólido, primeiro use uma alça de inoculação para pegar um anel de solução salina normal e colocá-lo no centro da lâmina, em seguida, use uma alça de inoculação estéril para pegar uma pequena quantidade de cultura e triturá-la uniformemente em solução salina normal e espalhe em 1cm2 Grandes ou pequenas superfícies pintadas, deixe secar naturalmente à temperatura ambiente ou seque lentamente à distância.
2. O objetivo da fixação é matar bactérias, coagular proteínas e estruturas bacterianas e facilitar a coloração; promover a adesão de bactérias à lâmina para evitar que sejam arrastadas pela água durante a lavagem; alterar a permeabilidade das bactérias aos corantes, o que é benéfico para a estrutura das células bacterianas da coloração. Geralmente é fixado por aquecimento com chama, e a mancha seca é passada rapidamente pela chama por 3 vezes. É melhor não queimar a pele do dorso da mão ao tocar na lâmina.
3. Tingimento De acordo com diferentes propósitos de inspeção, escolha diferentes métodos de tingimento para tingimento. Ao tingir, adicione a solução de corante gota a gota para aumentar a cobertura.
4. Mordente Qualquer substância que pode aumentar a afinidade entre o corante e o objeto tingido, fixar o corante no objeto tingido e causar uma alteração na permeabilidade da membrana celular é chamada de mordente. Comumente usados são alume, ácido tânico, sais metálicos e iodo, etc., e o aquecimento também é usado para promover a coloração. Os mordentes podem ser usados entre a coloração primária e a contracoloração, e também podem ser usados após a fixação ou contidos no fixador e na coloração.
5. Descoloração Qualquer agente químico que pode remover a cor do objeto tingido é chamado de descolorante. Etanol, acetona, etc. são comumente usados como descolorantes. O agente descolorante pode detectar o grau de estabilidade da combinação de bactérias e corantes, que podem ser usados para coloração diferencial.
6. Contracoloração Bactérias ou suas estruturas que foram descoloridas são frequentemente contrastadas com uma solução de contracoloração para facilitar a observação. A cor da solução de contraste é diferente daquela da solução de tingimento primário para formar um forte contraste. A contracoloração não deve ser muito forte, para não encobrir a cor da coloração inicial.
