O que é microscopia de campo escuro? Quão pequena uma célula pode ser vista?
O microscópio de campo escuro é um tipo de microscópio óptico, também chamado de ultramicroscópio. Há um escudo de luz no centro do condensador de um microscópio de campo escuro para que a luz de iluminação não entre diretamente na lente humana. Somente a luz refletida e difratada pela amostra pode entrar na lente objetiva. Portanto, o fundo do campo de visão é preto e as bordas dos objetos são brilhantes. de. Este tipo de microscópio pode ver partículas tão pequenas quanto 4 ~ 200 nm, e a resolução pode ser 50 vezes maior do que a dos microscópios comuns.
princípio
O microscópio de campo escuro é modificado com base na estrutura do microscópio óptico comum, utilizando o princípio do efeito óptico Tyndall. Os condensadores de campo escuro permitem bloquear o feixe central da fonte de luz. Não é possível entrar na lente objetiva através da amostra de baixo para cima. Como resultado, a luz muda seu caminho e irradia obliquamente sobre a amostra observada. A amostra é refletida ou espalhada ao encontrar a luz. A luz espalhada é lançada na lente objetiva, de modo que todo o campo de visão fica escuro.
O princípio básico da microscopia de campo escuro é o efeito Tyndall. Quando um feixe de luz passa por uma sala escura, um "caminho" de poeira brilhante pode ser observado no ar na direção perpendicular à luz incidente. Este fenômeno é o efeito Tyndall. Depois que um microscópio de campo escuro é substituído por um condensador de campo escuro em um microscópio óptico comum, devido à oclusão da estrutura parabólica interna do condensador, a luz que irradia na superfície do objeto a ser inspecionado não pode entrar diretamente na objetiva lente e ocular, e apenas a luz dispersa pode passar, reduzindo assim o campo de visão. está escuro. Como o microscópio de campo escuro não emite luz transparente no sistema de observação direta, quando não há objeto, o campo de visão fica escuro e é impossível observar qualquer objeto; quando há um objeto, a luz difratada de volta pelo objeto e a luz espalhada são claramente visíveis no fundo escuro. . Ao observar um objeto em um campo escuro, a maior parte da luz de iluminação é refratada. Devido à localização, estrutura e espessura do objeto (amostra), a dispersão e a refração da luz variam muito.
Estrutura e modificação
A estrutura básica de um microscópio de campo escuro é um conjunto óptico de microscópio comum mais uma barreira de luz. Um microscópio comum pode ser convertido em um microscópio de campo escuro, desde que o condensador seja removível e o diâmetro do suporte seja adequado para a instalação de um condensador de campo escuro. Quando não há condensador de campo escuro, você pode usar papel preto grosso para fazer um escudo de luz central e colocá-lo na estrutura do filtro sob o condensador de um microscópio comum para obter o efeito de campo escuro. O escudo de luz é usado para bloquear a luz no meio da fonte de luz, de modo que a luz só possa entrar na amostra vinda dos arredores. O tamanho é quase igual ao tamanho da abertura. Diferentes ampliações usam aberturas diferentes, portanto, diferentes blocos de luz precisam ser feitos.
Aplicação prática
A microscopia de campo escuro é frequentemente usada para observar amostras transparentes não coradas. Como estas amostras têm um índice de refração semelhante ao do ambiente circundante, são difíceis de ver claramente sob condições normais de campo claro. Portanto, condições de campo escuro são utilizadas para melhorar o contraste entre a própria amostra e o fundo. Este tipo de microscópio pode ver partículas tão pequenas quanto 4 ~ 200 nm. Ele só pode ver a existência, o movimento e as características da superfície do objeto, mas não consegue distinguir a estrutura fina do objeto. Clinicamente, a microscopia de campo escuro é comumente usada para examinar espiroquetas pálidas. Este é um teste de patógeno de grande importância para o diagnóstico da sífilis precoce.
