O que é um microscópio de contraste de fase
Um microscópio de contraste de fase é um microscópio que pode converter a diferença de fase (ou diferença de caminho óptico) gerada quando a luz passa através de um objeto em uma mudança na amplitude (intensidade da luz). Usado principalmente para observar células vivas, seções de tecido não coradas ou amostras coradas sem contraste.
O olho humano só consegue distinguir mudanças no comprimento de onda (cor) e na amplitude da luz visível, mas não consegue distinguir mudanças na fase. A maioria das amostras biológicas são altamente transparentes e a amplitude das ondas de luz permanece basicamente inalterada após a passagem, apenas com mudanças de fase.
O microscópio de contraste de fase basicamente converte a diferença do caminho óptico da luz visível que passa pela amostra em diferença de amplitude, melhorando assim o contraste entre várias estruturas e tornando-as claras e visíveis. A luz refrata através da amostra, desviando-se do caminho da luz original e sendo atrasada em 1/4 λ (comprimento de onda), se aumentada ou diminuída em 1/4 λ, então a diferença do caminho óptico torna-se 1/2 λ, A interferência entre os dois eixos fotossintéticos são fortalecidos e a amplitude aumenta ou diminui, aumentando o contraste.
Do ponto de vista estrutural, a diferença entre a microscopia de contraste de fase e a microscopia óptica comum reside em:
1. Abertura anular Diafragma com abertura circular, instalado entre a fonte de luz e o condensador, para formar um cone oco de luz que passa pelo condensador e focaliza-o na amostra.
2. O microscópio de diferença de fase adicionou uma placa de fase revestida com fluoreto de magnésio dentro da lente objetiva para atrasar a fase da luz direta ou difratada em 1/4 λ. Existem duas áreas na placa de fase, a parte por onde passa a luz direta é chamada de "superfície conjugada" e a parte por onde passa a luz difratada é chamada de "superfície de compensação". A placa de fase é dividida em dois tipos de acordo com seu efeito de funcionamento:
(1) Uma placa de fase positiva: atrasa a luz direta em 1/4 λ. Após a combinação de dois conjuntos de ondas de luz, a amplitude das ondas de luz aumenta e a estrutura da amostra torna-se mais brilhante do que o meio circundante, formando um contraste brilhante (também conhecido como contraste negativo).
(2) Placa de fase B mais: atrasando a luz de difração em 1/4 λ. Depois que os dois conjuntos de raios de luz se fundem, as ondas de luz são subtraídas e a amplitude diminui, resultando em uma estrutura de amostra mais escura do que o meio circundante, formando um contraste escuro (também conhecido como contraste positivo). Uma objetiva com uma placa de fase é chamada de objetiva de contraste de fase, e a palavra "Ph" é frequentemente usada na parte externa da objetiva.
