O que um microscópio de fluorescência faz
Os microscópios de fluorescência utilizados para aplicações de pesquisa funcionam com base em um conjunto de filtros ópticos:
Um filtro de excitação
um divisor de feixe
um filtro de emissão
Esses filtros são geralmente inseridos juntos em um bloco de filtro (microscópios compostos) ou em um receptáculo plano (principalmente estereomicroscópios).
O filtro de excitação selecionará o comprimento de onda para excitar um corante específico dentro da amostra, e o filtro de emissão atua como um controle de qualidade, permitindo a passagem apenas do comprimento de onda emitido por um fluoróforo específico. Filtros dicróicos são usados para refletir a luz na banda de excitação e passar a luz na banda de emissão para produzir luz incidente de fluorescência clássica.
A fluorescência é um dos fenômenos físicos mais utilizados em microscopia biológica e analítica, principalmente devido à sua alta sensibilidade e especificidade. A fluorescência é uma forma de luminescência fria.
A microscopia de fluorescência permite ainda ao usuário determinar a distribuição e o número de espécies moleculares individuais e sua localização dentro da célula. O estudo da co-regionalização e interações, concentrações de íons, bem como a observação de processos de citose e citotoxicidade entre células podem ser alcançados.
Com a ajuda da microscopia de fluorescência de super-resolução, até mesmo estruturas de sub-resolução podem ser visualizadas.
