Quais são os requisitos de amostra para microscopia de luz?
No processo de preparação da amostra do microscópio óptico, a espessura da fatia da amostra está entre 2 e 25um; a espessura da fatia do microscópio eletrônico está dentro de 50-100nm (exceto para o microscópio eletrônico de alta tensão, a espessura da amostra pode chegar a 1um), então o método de corte usado não é o mesmo.
Em termos de suporte, o suporte da seção do microscópio óptico é uma lâmina de vidro e o suporte da seção do microscópio eletrônico é a grade do suporte.
Em termos de fixação, as seções do microscópio óptico são fixadas com um fixador composto, enquanto as seções do microscópio eletrônico são fixadas repetidamente com um único fixador
Em termos de coloração, a coloração de amostras ópticas é relativamente simples. De acordo com diferentes amostras de observação e o tipo de microscópio óptico, geralmente é suficiente usar alguns corantes fixos. Existem muitos métodos para recolorir amostras de microscópio eletrônico, e eles também são muito complicados, como coloração negativa, coloração de prata e assim por diante.
Em termos de inclusão, parafina, colódio, gelatina, etc. são usados como agentes de inclusão para seções de microscópio óptico; resina epóxi, resina de poliestireno, resina de isobutileno e resina solúvel em água são usadas como agentes de incorporação para seções de microscópio eletrônico.
Para fazer com que o campo de visão do microscópio receba iluminação uniforme e suficiente, é necessário ajustar o sistema de caminho óptico de iluminação quando o microscópio é instalado e depurado pela primeira vez. requisitos. Além disso, entender corretamente o ajuste do sistema de caminho óptico de iluminação é uma etapa necessária após a substituição da lâmpada no processo de uso do microscópio e também é um meio necessário para testar o desempenho do microscópio de tempos em tempos no processo de uso diário. O ajuste do sistema de caminho óptico de iluminação do microscópio inclui principalmente os 4 itens a seguir: 1. Ajuste preliminar da câmara da lâmpada da fonte de iluminação fora do microscópio ① Primeiro, abra o invólucro da câmara da lâmpada e coloque a lâmpada de halogênio no soquete pressionando o clipe de mola. A sujeira, como impressões digitais deixadas na lâmpada, afetará a vida útil da lâmpada. ②Coloque a sala da lâmpada sobre a mesa, depois de ligar a energia, use uma chave de fenda especial para ajustar o orifício do botão de foco da lâmpada (marcado com "←→"), para que o filamento seja projetado na parede 1-2 m de distância e a imagem do filamento é ajustada. Em seguida, ajuste a altura da lâmpada para ajustar o orifício do filamento (marcado com "──") para tornar a posição do filamento apropriada; em seguida, ajuste os orifícios dos parafusos de ajuste da posição esquerda e direita da lâmpada (marcados com "──") para tornar a posição esquerda e direita do filamento apropriada.
2. O objetivo da inspeção e correção da posição do iluminador da fonte de luz (filamento) no microscópio é ajustar a extremidade da imagem do iluminador no campo de visão da lente objetiva e garantir que o campo de visão do microscópio é total e uniformemente recebido da perspectiva da fonte de luz. Iluminação, que é um pré-requisito para ajustar o sistema de iluminação Kühler. Ferramentas básicas necessárias: Telescópios de centragem são equipados com aquisição de microscópio. ① Desconecte a luva de vidro fosco no compartimento da lâmpada e coloque-o de volta no microscópio ② Selecione uma lente objetiva de 10×, ligue o programa da fonte de luz para encontrar a amostra e ajuste o foco com clareza e, em seguida, use uma objetiva de 40× lente para focalizar a amostra claramente (lente objetiva 40× A imagem inteira do filamento pode ser vista claramente); ③ Abra tanto o diafragma de abertura quanto o diafragma de campo do condensador ao máximo; ④ Desconecte uma das oculares, substitua-a por um telescópio centralizador, segure a parte branca e estenda a ocular preta com a outra mão. A imagem do filamento pode ser vista no campo de visão; ⑤Se a posição do filamento não for adequada, ajuste o orifício "──", ajuste a imagem do filamento na direção horizontal, ajuste o orifício "──" e ajuste a imagem do filamento na direção vertical até Ajustar a imagem do filamento para uma circular imagem que apenas preenche a abertura da objetiva; ⑥ Após o ajuste, insira a luva de vidro fosco de volta à sua posição original, desconecte o telescópio centralizador e recoloque a ocular para o próximo ajuste. O ajuste acima mencionado da sala da lâmpada da fonte de luz de iluminação fora do microscópio e a calibração da posição do iluminador da fonte de luz dentro do microscópio só precisam ser realizados quando o microscópio é instalado e depurado pela primeira vez e a lâmpada é substituído. Em caso de confusão, você pode restaurá-lo ao estado original de acordo com as etapas acima.
3. Ajuste correto do sistema de iluminação Kohler (Kohler) Ajuste correto do microscópio, uma das principais tarefas é o ajuste do sistema de caminho de luz de iluminação, e a chave é o ajuste do sistema de iluminação Kohler. Para todos os que usam microscópios, especialmente aqueles que fazem micrografias, eles devem ter uma certa compreensão e domínio dos princípios do sistema de iluminação Kühler e suas etapas de ajuste, para que possam desempenhar plenamente as funções do microscópio. As fotos resultantes podem ser mais consistentes e com efeito perfeito. O princípio do sistema de iluminação Kühler é simples: a luz emitida por qualquer ponto no iluminador da fonte de luz pode iluminar o campo de visão do microscópio, e a luz emitida por cada ponto no iluminador da fonte de luz é coletada e está em o campo de visão do microscópio. Obtém-se uma iluminação muito suficiente e uniforme. O objetivo de ajustar o sistema de iluminação Kuhler é obter uma iluminação uniforme e suficiente para o campo de visão observado e evitar que a luz difusa afete ou interfira no sistema de imagem, de modo a evitar a formação de neblina no negativo durante a fotografia. Componentes essenciais de um sistema de iluminação Kühler de alto ajuste: diafragma de campo, sistema condensador com ajuste no eixo. ① Selecione 10× lente objetiva e 10× ocular ② Coloque a lente frontal do condensador no caminho ótico, ajuste o diafragma de abertura para uma posição moderada (nem muito grande nem muito pequeno), então levante o condensador para a posição superior e ajuste a plataforma giratória do condensador para a posição "J" do campo claro ③ Ajuste o diafragma de campo para o mínimo (0,1)
④ Coloque a amostra biológica selada no palco, ligue a fonte de luz e foque claramente
⑤ Uma área localmente iluminada ou ponto brilhante aparecerá no campo de visão, que é uma imagem borrada do diafragma de campo, na qual os detalhes da amostra podem ser vistos claramente; Veja os detalhes da amostra claramente
⑥ Abaixe ligeiramente o condensador, de modo que o ponto brilhante no campo de visão se estreita gradualmente e gradualmente se torne uma imagem poligonal clara, que é a imagem clara do diafragma de campo;
⑦ Em circunstâncias normais, a imagem poligonal não está no centro do campo de visão. É necessário ajustar um par de parafusos de centralização do condensador para ajustar a imagem poligonal do campo de visão para a posição central;
⑧ Abra gradualmente o diafragma do campo de visão para fazer com que a imagem poligonal se torne um polígono inscrito do campo de visão e verifique ainda mais a condição de alinhamento. Se o alinhamento não for o ideal, continue ajustando levemente o parafuso de alinhamento;
⑨ Abra levemente o diafragma de campo para fazer a imagem poligonal desaparecer na borda do campo de visão. Neste ponto, o ajuste do sistema de iluminação Kühler está concluído. Depois que o sistema de iluminação Kühler foi ajustado, todo o campo de visão foi iluminado uniformemente e as micrografias ficaram brilhantes e claras com contraste normal.
