Quais são as diferenças entre um microscópio de contraste de fase e um microscópio comum?
O microscópio de contraste de fase é um microscópio especial que converte a diferença de caminho óptico (diferença de fase ou seja) gerada quando a luz passa pelos detalhes das amostras transparentes em diferença de intensidade da luz.
Quando a luz passa por uma amostra relativamente transparente, não há alteração significativa no comprimento de onda (cor) e amplitude (brilho) da luz. Portanto, ao observar amostras não manchadas (como células vivas) sob um microscópio óptico regular, sua morfologia e estrutura interna geralmente são difíceis de distinguir. No entanto, devido aos diferentes índices de refração e espessuras de várias partes da célula, haverá uma diferença no comprimento do caminho óptico entre a luz direta e difratada quando a luz passar por esse espécime. À medida que o comprimento do caminho óptico aumenta ou diminui, a fase das ondas de luz acelerada ou atrasada mudará (resultando em uma diferença de fase). The phase difference of light is imperceptible to the naked eye, but a phase contrast microscope can use its special device - a circular aperture and a phase plate - to convert the phase difference of light into an amplitude difference (brightness difference) that can be perceived by the human eye through the interference phenomenon of light, thereby making the originally transparent object exhibit significant differences in brightness and darkness, enhancing contrast, and allowing us to observe live cells and Algumas estruturas sutis dentro das células que não podem ser vistas ou claramente observadas sob microscópios ópticos comuns e microscópios de campo escuro.
O princípio de imagem de um microscópio de contraste de fase: durante a inspeção, a fonte de luz só pode passar por um anel transparente com uma abertura circular e, depois de passar por um condensador, é condensado em um feixe de luz. Quando esse feixe de luz passa pelo objeto que está sendo inspecionado, ele passa por graus variados de deflexão (difração) devido aos diferentes caminhos ópticos de cada parte. Devido ao fato de que a imagem formada pelo anel transparente coincide com o plano conjugado na placa de fase e o plano focal atrás da lente objetiva. Portanto, a luz reta sem desvio passa pela superfície do conjugado, enquanto a luz difratada com desvio passa pela superfície de compensação. Devido às diferentes propriedades da superfície do conjugado e superfície de compensação na placa de fase, elas produzirão respectivamente uma certa diferença de fase e redução de intensidade da luz que passa por essas duas partes. Os dois conjuntos de luz convergirão através da lente traseira e viajam no mesmo caminho óptico novamente, causando interferência entre a luz direta e a luz difratada, transformando a diferença de fase em uma diferença de amplitude. Dessa maneira, durante a microscopia de contraste de fase, a diferença de fase que não pode ser distinguida pelo olho humano é convertida em uma diferença de amplitude (diferença de brilho) que pode ser distinguida pelo olho humano através da luz de um corpo transparente incolor.
