Existem dois tipos de microscópios de fluorescência em termos de caminhos ópticos:
1. Microscópio de fluorescência de transmissão: A fonte de luz de excitação é usada para excitar a fluorescência passando através do material da amostra através de uma lente condensadora. Concentradores de campo escuro comumente usados também podem ser usados, e concentradores comuns podem ser usados para ajustar o refletor para redirecionar e lóbulo lateral a luz de excitação para a amostra. Este é um microscópio de fluorescência relativamente{3}antigo. Sua vantagem é a forte fluorescência em baixa ampliação, mas sua desvantagem é que sua fluorescência diminui com o aumento da ampliação. Portanto, é melhor observar materiais de amostras maiores.
2. O microscópio de fluorescência com luz descendente é um novo tipo de microscópio de fluorescência desenvolvido nos tempos modernos. Ao contrário do acima, a luz de excitação cai da lente objetiva para baixo na superfície da amostra, usando a mesma lente objetiva que o condensador de iluminação e a lente objetiva para coletar a fluorescência. Um divisor de feixe de duas cores precisa ser adicionado ao caminho óptico, que está a 45 graus de distância do urânio leve. Ângulo, a luz de excitação é refletida na lente objetiva e focada na amostra. A fluorescência gerada pela amostra, bem como a luz de excitação refletida na superfície da lente objetiva e da lamela, entram na lente objetiva e retornam ao divisor de feixe de duas cores, separando a luz de excitação e a fluorescência. A luz de excitação residual é então absorvida pelo filtro de bloqueio. Se diferentes combinações de filtros de excitação/separadores de feixe de cor dupla/filtros de bloqueio forem usadas, elas poderão atender às necessidades de diferentes produtos de reação fluorescente. As vantagens deste microscópio de fluorescência são iluminação de campo uniforme, imagem nítida e fluorescência mais forte com ampliação maior.
