O método de preparação de lâminas de microscópio
1. Método de esfregaço
O método de esfregaço é um método de preparação de lâminas revestindo-as uniformemente com materiais.
Os materiais de esfregaço incluem organismos-unicelulares, pequenas algas, sangue, meios de cultura bacterianos, tecidos soltos de animais e plantas, testículos, anteras, etc.
Ao manchar, deve-se prestar atenção a:
(1) A lâmina de vidro deve ser limpa.
(2) A lâmina de vidro deve ser plana.
(3) O revestimento deve ser uniforme. Aplique a gota no meio direito da lâmina de vidro e espalhe-a uniformemente com uma lâmina de dissecação ou um palito.
(4) O revestimento deve ser fino. Usando outra lâmina de vidro como lâmina, empurre suavemente da direita para a esquerda ao longo da superfície da lâmina de vidro com o líquido aplicado (o ângulo entre as duas lâminas deve ser de 30 graus a 45 graus) e aplique uma camada fina e uniforme.
(5) Fixo. Se for necessária fixação, fixadores químicos ou métodos de secagem (bactérias) podem ser usados para fixação.
(6) Coloração. As bactérias usam azul de metileno e o sangue usa solução de coloração de Wright. A solução corante deve cobrir toda a superfície do revestimento.
(7) Enxaguar. Use papel absorvente para absorver ou secar.
(8) Sele o filme. Preservação de longo prazo usando filme de árvore canadense.
2. Método de prensagem de comprimidos
O método de compressão é um método de fatiar materiais biológicos, colocando-os entre uma lâmina de vidro e uma tampa, aplicando uma certa pressão para dispersar as células do tecido.
O processo geral do método de prensagem de comprimidos:
(1) Seleção de materiais. Para observar a divisão celular, células de tecido fresco com divisão celular vigorosa devem ser selecionadas como materiais. Como ponta da raiz, meristema da ponta do caule, células da medula óssea, anteras (células-mãe do pólen). Ninhos de esperma (espermatócitos), etc.
(2) Fixo. A fixação do material pode ser determinada de acordo com a necessidade, devendo a amostra ser imediatamente comprimida e observada. Não é necessário realizar tratamento de fixação separado (síncrono com coloração); Caso o material não seja inspecionado imediatamente após a amostragem, ele poderá ser fixado com um fixador (geralmente fixador de álcool ácido acético). Após fixação por 2 a 24 horas (dependendo do material), enxaguar com etanol 95% e armazenar em etanol 70% para uso posterior.
(3) Separação. Os materiais que não são facilmente dispersos pelas células devem ser tratados com uma solução de separação por hidrólise (como HCl 1N ou sêmen de ácido clorídrico) por 6 a 20 minutos. Após a dissociação, devem ser enxaguados com água antes da coloração.
(4) Coloração. Existem muitos tipos de corantes. Os cromossomos são comumente corados com solução de coloração magenta de ácido acético.
(5) Pressione o tablet. Coloque o material sobre uma lâmina de vidro, adicione uma gota de água ou solução corante, cubra a lâmina com uma tampa e pressione suavemente com o polegar.
(6) Observe. Após a compressão, pode ser observado ao microscópio.
