Semelhanças e diferenças entre microscópio de contraste de fase, microscópio invertido e microscópio de luz comum
Esses tipos de microscópios são todos microscópios ópticos, que usam luz visível como método de detecção, o que é diferente dos microscópios eletrônicos, microscópios de tunelamento de varredura e microscópios de força atômica.
Especificamente:
Microscópio de contraste de fase, também conhecido como microscópio de contraste de fase. Porque a luz produzirá uma ligeira diferença de fase ao passar por uma amostra transparente, e essa diferença de fase pode ser convertida em uma mudança na amplitude ou contraste da imagem, de modo que a diferença de fase possa ser usada para geração de imagens. Foi inventado por Fritz Zernike na década de 1930 enquanto estudava redes de difração. Por isso recebeu o Prêmio Nobel de Física em 1953. Atualmente é amplamente utilizado para fornecer imagens de contraste para espécimes transparentes, como células vivas e tecidos de pequenos órgãos.
Microscopia confocal: É um método de imagem óptica que usa iluminação ponto a ponto e modulação espacial para remover a luz espalhada do plano sem foco da amostra. Comparado com os métodos de imagem tradicionais, pode melhorar a resolução óptica e o contraste visual. A luz da sonda emitida por uma fonte de luz pontual é focada no objeto observado através da lente. Se o objeto estiver apenas em foco, a luz refletida deverá convergir de volta para a fonte de luz através da lente original. Este é o chamado confocal, ou confocal, para abreviar. Um espelho dicróico é adicionado ao caminho óptico da luz refletida no microscópio confocal para curvar a luz refletida que passou pela lente para outras direções. Há um pinhole (Pinhole) em seu foco, e o pinhole está localizado no foco. Atrás do defletor está um tubo fotomultiplicador (PMT). Pode-se imaginar que a luz refletida antes e depois do foco da luz de detecção passa por este conjunto de sistema confocal, mas não pode ser focada no pequeno orifício, e será bloqueada pelo defletor. O fotômetro então mede a intensidade da luz refletida no ponto focal. Seu significado é: um objeto translúcido pode ser escaneado em três dimensões movendo o sistema de lentes. Tal conceito foi proposto pelo estudioso americano Marvin Minsky em 1953. Após 30 anos de desenvolvimento, o laser foi usado como fonte de luz para desenvolver um microscópio confocal que atendesse ao ideal de Marvin Minsky.
Microscópio invertido: A composição é a mesma de um microscópio comum, exceto que a lente objetiva e o sistema de iluminação são invertidos, o primeiro fica sob a platina e o último acima da platina. Operação conveniente e instalação de outros equipamentos de aquisição de imagem relacionados.
Um microscópio óptico é um microscópio que usa uma lente óptica para produzir um efeito de ampliação de imagem. A luz incidente por um objeto é ampliada por pelo menos dois sistemas ópticos (objetiva e ocular). Primeiro, a lente objetiva produz uma imagem real ampliada e o olho humano observa a imagem real ampliada através da ocular, que funciona como uma lupa. Um microscópio óptico geral possui múltiplas lentes objetivas substituíveis para que o observador possa alterar a ampliação conforme necessário. Essas lentes objetivas são geralmente colocadas em um disco de lentes objetivas giratório, e as diferentes oculares podem ser convenientemente inseridas no caminho óptico girando o disco de lentes objetivas. Os físicos descobriram a lei entre ampliação e resolução, e as pessoas sabiam que a resolução dos microscópios ópticos tem um limite. Este limite de resolução limita o aumento infinito da ampliação. 1.600 vezes tornou-se o limite máximo de ampliação dos microscópios ópticos, o que limita bastante a aplicação da morfologia em muitos campos.
A resolução dos microscópios ópticos é limitada pelo comprimento de onda da luz, geralmente não excedendo 0,3 mícrons. A resolução também pode ser melhorada se o microscópio usar luz ultravioleta como fonte de luz ou se o objeto for colocado em óleo. Esta plataforma tornou-se a base para a construção de outros sistemas de microscopia óptica.
