Uso adequado do microscópio de fluorescência invertida
O microscópio de fluorescência invertida é um microscópio multifuncional usado no campo da pesquisa científica biológica de ponta. Sua estrutura é complexa e cara. Portanto, para que os alunos de graduação em medicina compreendam corretamente a operação e o uso do microscópio de fluorescência invertido, os professores devem primeiro demonstrar a operação real do microscópio de fluorescência invertido. Antes, foi criado um curso para aprender os conhecimentos básicos de microscópios de fluorescência invertidos, apresentando a estrutura, princípio, função e métodos básicos de uso de microscópios de fluorescência invertidos, e depois na operação específica, para diferentes espécimes, demonstrar diferentes funções, desde rasos a fundo, gradualmente Padronizar o uso de microscópios de fluorescência invertidos por estudantes de graduação em medicina.
1. Uso correto da observação de campo claro. Uma das funções do microscópio de fluorescência invertido é a observação de campo claro. O princípio básico é que depois que a amostra é irradiada pela luz, a absorção de luz de cada parte é diferente para realizar a imagem em um fundo claro. É principalmente adequado para células coradas ou coloridas, Observação de espécimes, como seções de tecido.
2. Uso correto da observação de contraste de fase. A segunda função do microscópio de fluorescência invertido é a observação de contraste de fase. Seu princípio básico é converter a diferença do caminho óptico de diferentes partes da amostra em diferença de amplitude. A observação é realizada através de uma lente objetiva de contraste de fase com uma placa de fase e uma lente condensadora com um diafragma anelar. É aplicável principalmente à observação de células vivas ou cortes de tecidos não corados, no processo de ensino experimental, além de orientar corretamente os alunos de graduação em medicina a observar os métodos básicos de operação da observação de contraste de fase, é mais importante orientá-los a compreender e dominar os espécimes usados para observação de contraste de fase. Para eles, a observação microscópica de células cultivadas é a mais utilizada em futuras pesquisas científicas. Em primeiro lugar, para a seleção do equipamento celular, geralmente é recomendado o uso de pratos de cultura de vidro e plástico, placas de cultura e frascos de cultura. A maioria deles é incolor e transparente e pode ser observada diretamente em um microscópio fluorescente invertido sem derramar o fluido celular e outros tratamentos. Em segundo lugar, durante a observação microscópica, não abra a tampa do equipamento à vontade, para não contaminar as células. Finalmente, para os operadores, eles precisam usar luvas, máscaras e jalecos brancos, que podem não apenas proteger sua própria saúde, mas também evitar a contaminação das células.
3. Uso correto da observação de fluorescência. A terceira função do microscópio de fluorescência invertido é a observação da fluorescência. O princípio básico é usar luz de excitação para excitar a amostra para gerar fluorescência, de modo a realizar a observação da forma e posição da amostra. É principalmente adequado para a observação de amostras marcadas com fluorescência. A observação de fluorescência é uma função importante de um microscópio de fluorescência invertido, e seus acessórios são caros e especiais de usar. Para que os alunos de graduação em medicina compreendam corretamente a operação e o uso da observação de fluorescência, os professores não devem apenas ensinar-lhes os métodos básicos de operação, mas, mais importante, ensiná-los a dominar sua particularidade. Em primeiro lugar, na preparação de amostras, a lâmina de vidro e a lamínula devem ter superfície lisa e espessura adequada (a lâmina de vidro deve ter entre 0,8mm e 1,2mm, e a lamínula deve ter cerca de { {5}}.17mm); a amostra deve ter espessura adequada e evitar sobreposição de células ou mascaramento por impurezas; o meio de montagem deve usar uma mistura de igual volume de glicerol e tampão carbonato (0.5mol/L pH9.0-9.5). Em segundo lugar, antes da observação fluorescente, a luz elétrica da sala e a luz branca do microscópio fluorescente invertido devem ser desligadas para garantir o ambiente em uma sala escura. Finalmente, na observação de fluorescência, o tempo de observação deve ser rigorosamente controlado, geralmente 1-2 horas/hora é apropriado, caso contrário, a fluorescência irá atenuar e desaparecer; ao ajustar a fonte de luz, use óculos de proteção para evitar os danos dos raios ultravioleta aos óculos.
4. Uso correto da captura de imagens. Na pesquisa científica, não é apenas necessário que o microscópio de fluorescência invertido possa realizar várias observações, mas também requer que o microscópio de fluorescência invertido possa realizar a captura de imagens. O sistema de microscópio de fluorescência invertida combina um microscópio óptico com um computador por meio de conversão fotoelétrica, não apenas para observação microscópica na ocular, mas também para observação dinâmica de imagens em tempo real, edição e salvamento no computador.
