Princípios e características da microscopia de campo escuro
1. O princípio e características estruturais do microscópio de campo escuro
A diferença entre um microscópio de campo escuro e um microscópio geral de campo brilhante está em seus diferentes concentradores. Um microscópio de campo escuro é equipado com um concentrador sombreado centralmente, o que impede que a luz passasse pelo concentrador e apenas permite que ela seja projetada obliquamente na amostra na lâmina de vidro das quatro bordas do concentrador e das áreas não marcadas. Devido à natureza oblíqua da luz, ela não pode entrar na lente objetiva, resultando em um campo de visão escuro para observação. No entanto, a luz emitida pelo condensador em um ângulo oblíquo nas células bacterianas emite uma luz brilhante devido à dispersão da luz, que é refletida de volta na lente objetiva. Como resultado, a imagem do objeto brilhante no campo de visão escura pode ser visto no microscópio.
2. Método de operação
① Use um microscópio de pesquisa em campo escuro ou remova o condensador de um microscópio óptico regular e substitua -o por um condensador de campo escuro.
② Seja usando uma lente de objetivo seco ou uma lente objetiva imersa de óleo, uma grande gota de alcatrão deve ser adicionada à lente superior do condensador durante a inspeção do espelho.
③ Coloque a amostra de gotícula pendurada preparada no palco e levante o condensador na parte superior para permitir que o óleo entre em contato com o slide.
④ Amplifique a fonte de luz.
⑤ Ajuste e concentre o eixo óptico do condensador. Use uma lente de 10 * objetivos para encontrar a imagem do objeto que está sendo inspecionado. Abaixe a abertura da íris do condensador até que o contorno do campo da abertura possa ser visto no campo de visão. Em seguida, ajuste lentamente o condensador para cima e para baixo para tornar a imagem do campo da abertura mais clara. Se o campo da abertura não estiver no centro, use os dois botões de ajuste na parte externa do condensador para ajustá -lo. Quando o ponto de luz brilhante estiver no centro do campo de visão, aumente novamente para observar.
3. Precauções
① A abertura numérica da lente objetiva usada para a observação do campo escuro deve estar em torno de 1. 00-1. 25. Se estiver muito alto, o efeito pode não ser bom. É melhor usar uma lente objetiva com uma parada de campo e girar o anel de ajuste no meio do espelho do animal para alterar livremente o tamanho da abertura numérica.
② Os lâminas de vidro necessários e a tampa devem estar livres de arranhões e sem poeira, e a lente dianteira da lente objetiva também deve estar limpa e sem poeira. A espessura das lâminas de vidro e dos slides de tampa deve atender ao padrão. A lâmina de vidro é muito grossa e o foco do condensador cairá dentro do slide, incapaz de alcançar o plano do objeto que está sendo testado; Ao usar uma lente de óleo, devido à curta distância de trabalho da lente objetiva, é impossível se concentrar, resultando na incapacidade de ver ou ver claramente o objeto sendo inspecionado.
③ Durante a inspeção do espelho, a sala deve estar escura. Se essas condições não estiverem disponíveis, os dispositivos de sombreamento devem ser usados o máximo possível para impedir que a luz entre na ocular.
