Métodos de preparação para amostras de microscopia óptica e eletrônica
Os métodos de preparação microscópica geralmente incluem quatro categorias: método de corte, método de montagem completa, método de esfregaço e método de compressão.
①Método de fatiamento. A espessura do corte de um microscópio óptico está entre 2 e 25 mícrons. Geralmente, é apropriada uma espessura de corte de cerca de 10 mícrones para materiais animais e vegetais. Os métodos de seccionamento variam dependendo do meio de incorporação. Comumente usados são o método de corte em parafina, o método de corte coloidal de algodão, o método de corte congelado e o método de metacrilato de etilenoglicol (referido como método GMA). O método de corte em parafina inclui etapas como fixação, inclusão, corte, coloração, desidratação e montagem. O segredo é incorporar o material biológico na parafina, usar a parafina como suporte e cortar o material biológico imerso no bloco de cera em fatias finas ideais. O processo de operação é: fixação → lavagem com água → desidratação de álcool passo a passo de baixa concentração para alta concentração → transparência de xileno → imersão em cera → incorporação → seccionamento → patch → desparafinação de xileno → tratamento passo a passo com álcool de alta concentração para baixa concentração. Finalmente, ele faz a transição para água → tingimento → desidratação gradual de álcool de baixa concentração para álcool de alta concentração → transparência de xileno → selagem com cola de resina. As etapas básicas são as mesmas em todas as técnicas de produção.
②Método de vedação integral. Método de preparação de montagem completa para células individuais, organismos minúsculos ou órgãos dispersos. Este método também requer várias etapas de fixação, coloração, desidratação, transparência e montagem. Este método é usado para preparar paramécios e peças bucais de insetos.
③Método de esfregaço. Método de preparação no qual amostras biológicas facilmente dispersáveis são espalhadas em uma lâmina de vidro. Um esfregaço de sangue é um exemplo.
④Método de prensagem de tablet. Coloque tecidos naturais e facilmente dispersos ou tecidos que são facilmente dispersos após o processamento, como espermatócitos animais e células da ponta da raiz, em uma lâmina de vidro, adicione uma lamínula e esmague o tecido com força para fazer as células ou células dentro A estrutura é espalhar em uma camada de método de produção. O método de prensagem é frequentemente usado para observar cromossomos, geralmente corados com acetato magenta, líquen vermelho e fucsina carbólica.
