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Método de contagem direta microscópica microbiológica

Jan 22, 2025

Método de contagem direta microscópica microbiológica

 

O uso de um hemocitômetro para contar diretamente os microorganismos sob um microscópio é um método comumente usado para contagem microbiana. A vantagem desse método é sua intuitividade e velocidade. Coloque a suspensão bacteriana apropriadamente diluída (ou suspensão de esporos) na câmara de contagem entre a lâmina do hemocitômetro e a tampa e conte sob um microscópio. Devido ao volume constante da sala de contagem (0. 1mm2), o número total de microorganismos por unidade de volume pode ser convertido com base no número de microorganismos observados sob o microscópio. Devido ao fato de esse método calcular a soma das células bacterianas vivas e mortas, também é conhecido como o método total de contagem bacteriana.


Uma placa de contagem de células sanguíneas é geralmente uma lâmina de vidro especialmente projetada com quatro ranhuras formando três plataformas. A plataforma do meio é dividida pela metade por um sulco horizontal curto, e cada lado da plataforma é gravado com uma grade. Cada grade é dividida em nove quadrados grandes, e o quadrado grande no meio é a sala de contagem, onde a contagem microbiana é realizada.


Geralmente, existem duas especificações para a escala da sala de contagem. Uma é que um quadrado grande é dividido em 16 quadrados do meio e cada quadrado do meio é dividido em 25 pequenos quadrados (Figura VIII -2); Outro método é dividir um quadrado grande em 25 quadrados médios, e cada quadrado do meio é dividido em 16 pequenos quadrados (Figura VIII -1, c). Mas, independentemente do tamanho da placa de contagem, o número de pequenos quadrados em cada quadrado grande é o mesmo, ou seja, 16 × 25=400 pequenos quadrados,


Se o comprimento lateral de cada quadrado grande for de 1 mm, a área de cada quadrado grande será de 1 mm2. Depois de cobrir com um vidro de tampa, a altura entre o slide e o vidro da tampa é 0. 1mm, portanto, o volume da sala de contagem é 0. 1mm3.


Ao contar, o número total de bactérias em cinco quadrados é geralmente contado e, em seguida, o valor médio de cada quadrado é obtido. A multiplicar por 16 ou 25 fornece o número total de bactérias em um quadrado grande, que é então convertido para o número total de bactérias em 1 ml de solução bacteriana.

 

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