Principais componentes e funções do microscópio confocal a laser
1. Pinhole iluminador
Função: O laser passa pelo orifício de iluminação para formar uma fonte de luz pontual. A fonte de luz pontual tem vantagens únicas, como forte direcionalidade da fonte de luz, pequena divergência, alto brilho, alta coerência espacial e temporal e excitação de polarização plana. E forme um dispositivo confocal com o furo do detector e o plano focal.
2. Divisor de feixe
Função: Separar a fluorescência de excitação da amostra de outra luz sem sinal.
3. Lente objetiva
4. Plano focal
Função: A fonte de luz pontual do laser ilumina o objeto e focaliza-o no plano focal, estimulando a amostra marcada com fluorescência a emitir fluorescência para formar um ponto focal. O ponto de luz é processado por uma série de dispositivos, como a lente objetiva e o divisor de feixe, e é focado no orifício de iluminação e no orifício do detector, respectivamente. É daí que vem o significado de confocal.
5. Orifício do detector
Função: Atua como filtro espacial. Maximize a obstrução da luz espalhada do plano não focado e da luz espalhada fora do ponto não focado no plano de foco para garantir que todos os sinais de fluorescência recebidos pelo orifício do detector venham da posição de foco do ponto da amostra, de modo que o ponto focado de difração em a amostra e a detecção O ponto de imagem pinhole contém a mesma informação (dois pontos conjugados).
6. Tubo fotomultiplicador (detector)
Função: Receber o sinal luminoso que passa pelo pinhole, convertê-lo em sinal elétrico e transmiti-lo ao computador, para que apareça na tela uma imagem nítida de todo o plano focal.
7. Lasers: O desenvolvimento da tecnologia de microscopia confocal é inseparável do rápido desenvolvimento dos lasers. Podemos escolher diferentes lasers de acordo com as necessidades de pesquisa. Como ArUV (351,364 nm), HeCd (442 nm), AR (457, 488, 514 nm), ArKr (488, 568, 647 nm) Kr (568 nm), HeNe (543 nm), HeNe (633 nm), etc.
8. Múltiplos canais de fluorescência: Possui vários canais de fluorescência para obter múltiplas marcações de amostras ao mesmo tempo.
