Principais componentes e funções da microscopia confocal a laser
1. Orifício de iluminação
Função: Faça o laser passar pelo orifício de iluminação para formar uma fonte de luz pontual, que tem vantagens únicas, como forte direcionalidade, pequena divergência, alto brilho, alta coerência espacial e temporal e excitação de polarização planar. E forma um dispositivo confocal com o furo do detector e o plano focal.
2. Divisor de feixe
Função: Separe a fluorescência de excitação da amostra de outra luz sem sinal.
3. Lente objetiva
4. Plano focal
Função: A fonte de luz pontual do laser concentra-se no objeto no plano focal, estimulando a amostra marcada com fluorescência para emitir fluorescência e formar um ponto focal. O ponto de luz é processado por uma série de dispositivos, como uma lente objetiva e um divisor de feixe, e focado em dois locais: o pinhole de iluminação e o pinhole do detector. O significado de confocal vem disso.
5. Orifício do detector
Função: Funciona como um filtro espacial* Para maximizar a obstrução da luz espalhada do plano não focado e da luz espalhada fora do ponto não focal no plano focado, a fim de garantir que todos os sinais de fluorescência recebidos pelo orifício do detector venham da posição focal de o local da amostra. Portanto, o ponto focado de difração na amostra e o ponto de imagem pinhole do detector contêm a mesma informação (conjugado de dois pontos).
6. Tubo fotomultiplicador (detector)
Função: Receber sinais de luz através de furos, convertê-los em sinais elétricos e transmiti-los ao computador, resultando em uma imagem nítida de todo o plano focal na tela.
7. Laser: O desenvolvimento da tecnologia de microscopia confocal não pode ser separado do rápido desenvolvimento dos lasers. Podemos escolher diferentes lasers de acordo com nossas necessidades de pesquisa. Como ArUV (351,364nm), HeCd (442nm), AR (457488514nm), ArKr (488568647nm), Kr (568nm), HeNe (543nm), HeNe (633nm), etc.
8. Múltiplos canais de fluorescência: Ter múltiplos canais de fluorescência para obter múltiplas marcações de amostras simultaneamente.
