Introdução à microscopia de contraste de fase
Um microscópio de contraste de fase é um microscópio que converte a diferença de fase (ou diferença de alcance óptico) produzida quando a luz passa através de um objeto em uma mudança na amplitude (intensidade da luz). É usado principalmente para observar células vivas, secções de tecido não coradas ou amostras coradas sem contraste.
O olho humano só consegue identificar alterações no comprimento de onda (cor) e amplitude da luz visível, mas não alterações de fase. A maioria das amostras biológicas são altamente transparentes e a amplitude da onda de luz permanece basicamente inalterada após sua passagem, e apenas a mudança de fase existe.
A microscopia de contraste de fase basicamente transforma a diferença de alcance óptico da luz visível através da amostra na diferença de amplitude, o que melhora o contraste entre várias estruturas e torna várias estruturas claramente visíveis. A luz através da amostra após a refração, desviada do caminho da luz original, enquanto é atrasada em 1/4 λ (comprimento de onda), se então aumentar ou diminuir 1/4 λ, a diferença de alcance óptico torna-se 1/2 λ, os dois feixes de eixo de fotossíntese após interferência para fortalecer a amplitude aumenta ou diminui para melhorar o contraste.
Do ponto de vista estrutural, o microscópio de contraste de fase é diferente do microscópio óptico comum:
1. Diafragma em forma de anel com abertura em forma de anel do diafragma, instalado entre a fonte de luz e o concentrador, a função é fazer a luz passar pelo concentrador para formar um cone oco de luz, focando na amostra.
2. Microscópio de contraste de fase de placa de fase na lente objetiva dentro do aumento da placa de fase revestida com fluoreto de magnésio, o papel do atraso de fase de luz direta ou difratada 1/4 λ. A placa de fase possui duas áreas, luz direta através da parte chamada “superfície conjugada”, luz difratada através da parte chamada “superfície de compensação”. Superfície de compensação". A placa de fase é dividida em dois tipos de acordo com seu efeito de trabalho:
(1) Placa de fase A +: luz direta atrasada 1/4 λ, dois grupos de ondas de luz superposição de ondas de luz coaxiais, aumento de amplitude, a estrutura da amostra é mais brilhante que o meio circundante, a formação de contraste brilhante (ou contraste negativo ).
(2) Placa de fase B +: luz difratada atrasada 1/4 λ, dois grupos de ondas de luz após a fusão do eixo da redução de fase da onda de luz, a amplitude torna-se menor, a estrutura da amostra é mais escura do que a mídia circundante, o formação de contraste escuro (ou contraste positivo). A lente objetiva com uma placa de fase é chamada de lente objetiva de contraste de fase, geralmente no invólucro da lente objetiva com a palavra "Ph".
