Apresentando as vantagens e desvantagens da microscopia de varredura a laser multifotônica
Vantagens do microscópio de varredura a laser multifótons:
1, usando excitação de luz vermelha ou infravermelha, a dispersão da luz é pequena, a dispersão de pequenas partículas é inversamente proporcional à quarta potência do comprimento de onda.
2, nenhum furo é necessário para coletar mais fótons dispersos da seção transversal de imagem.
3, o pinhole não consegue distinguir entre os fótons dispersos emitidos pela região fora de foco ou área focal, multi-fóton na relação sinal-ruído de imagem profunda é bom.
4, excitação de fóton único de luz ultravioleta ou visível usada no feixe para atingir o plano focal antes que a amostra seja facilmente absorvida e atenuada, não é fácil de excitação profunda.
5, na observação do microscópio biológico, * a primeira consideração é não danificar o estado ativo do próprio organismo, para manter a umidade, a concentração de íons, a circulação de oxigênio e nutrientes. Em ocasiões de observação de luz, tanto a energia térmica quanto a de fótons devem permanecer na célula sem prejudicar a quantidade de irradiação, a energia luminosa.
6, o microscópio multifóton tem muitas vantagens. Tais como resolução tridimensional, intrusão de profundidade, eficiência de espalhamento, luz de fundo, relação sinal-ruído, controle, etc., o microscópio laser anterior não tem ou não pode ser comparado para superar as características do
Desvantagens do microscópio de varredura a laser multifótons:
1, apenas imagens de fluorescência.
2, se a amostra incluir cromóforos que podem absorver a luz de excitação, a amostra pode ser danificada termicamente.
3, a resolução é ligeiramente reduzida, embora possa ser melhorada pelo uso da abertura confocal ao mesmo tempo, mas a perda de sinal.
4. O custo da microscopia de varredura multifotônica é alto devido à limitação dos caros lasers ultrarrápidos.
