Como preparar amostras de microscópio eletrônico
Os principais métodos de preparação de amostras de observação para microscopia eletrônica de transmissão são:
1. Método de projeção
Sob condições de vácuo, átomos de metais pesados com forte capacidade de dispersão de elétrons são usados para pulverizar a superfície da amostra. Isto forma um forte contraste entre a amostra e a área não pulverizada, e a parte não pulverizada torna-se a projeção da amostra. De acordo com a projeção, podemos compreender a forma tridimensional e a altura da amostra. Este método é geralmente usado para observar flagelos bacterianos ou partículas virais.
2. Método de coloração negativa
Como esse método mancha o fundo da amostra para destacá-la, ele é chamado de coloração negativa. Geralmente, a amostra é cercada por substâncias com alta densidade eletrônica que não apresentam estrutura e não reagem com a amostra, como o sal sódico do ácido fosfotúngstico. Ao mesmo tempo, o corante também é colocado no interior do objeto de observação. Desta forma, ele pode não apenas exibir a forma, mas também refletir a estrutura interna da amostra até certo ponto. Células bacterianas, vírus, etc. podem ser observadas usando este método.
3. Método de corte ultrafino
Este é o método mais comumente usado porque permite a visualização de estruturas finas dentro de células ou outras amostras. Normalmente, a amostra deve ser fixada e desidratada de acordo com um determinado procedimento, depois embebida em resina como suporte e cortada em fatias extremamente finas usando um ultramicrótomo. Como apenas fatias com espessura de 20 a 100 nanômetros podem ser observadas com um microscópio eletrônico de transmissão, em amostras bacterianas em geral, uma célula deve ser dividida em 10 a 50 pedaços.
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