Como escolher entre um microscópio invertido e um microscópio de fluorescência?
Na cultura de células e experimentos derivados relacionados, o microscópio é um instrumento muito importante. Atualmente, existem vários tipos de microscópios no mercado. É um desafio escolher um microscópio que atenda às necessidades e seja aplicável. O seguinte é uma introdução aos princípios de microscópios invertidos e microscópios de fluorescência, para que você possa escolher facilmente.
A composição do microscópio invertido é a mesma do microscópio comum, incluindo principalmente três partes: a parte mecânica, a parte de iluminação e a parte óptica. A composição do microscópio invertido é a mesma do microscópio vertical comum, exceto que a lente objetiva e o sistema de iluminação são invertidos, o primeiro está sob a platina e o último está acima da platina. Essa estrutura pode expandir significativamente a distância efetiva entre o sistema de concentração de iluminação e o palco, o que é conveniente para colocar objetos mais espessos a serem observados, como pratos de cultura e frascos de cultura de células (claro, lâminas de vidro, etc. também estão disponíveis) , e ao mesmo tempo, a distância entre a lente objetiva e o material A distância de trabalho entre eles não precisa ser muito grande. Os microscópios invertidos são utilizados para observação de microorganismos, células, bactérias, cultura de tecidos, suspensões, sedimentos, etc. em unidades médicas e de saúde, instituições de ensino superior e institutos de pesquisa. Ele pode observar continuamente o processo de reprodução e divisão de células, bactérias, etc. no meio de cultura e pode tirar fotos de qualquer forma no processo. É amplamente utilizado em citologia, parasitologia, oncologia, imunologia, engenharia genética, microbiologia industrial, botânica e outros campos.
A microscopia de fluorescência é usada para estudar a absorção e transporte de substâncias nas células, a distribuição e localização de substâncias químicas, etc. Para o objeto sob inspeção, existem duas maneiras de gerar fluorescência: autofluorescência, que emite fluorescência diretamente após ser irradiado com ultravioleta luz; Algumas substâncias nas células, como a clorofila, produzem autofluorescência após serem irradiadas por raios ultravioleta; embora algumas substâncias não possam fluorescer, elas também podem emitir fluorescência secundária após serem coradas com corantes fluorescentes ou anticorpos fluorescentes após serem irradiadas por raios ultravioleta. O microscópio de fluorescência usa uma fonte de luz pontual com alta eficiência luminosa para emitir luz de um determinado comprimento de onda (luz ultravioleta 365nm ou luz azul roxa 420nm) através do sistema de filtro como luz de excitação e depois de excitar as substâncias fluorescentes na amostra para emitir fluorescência de vários cores, então a observação é realizada através da ampliação da lente objetiva e ocular. Desta forma, sob um fundo de forte contraste, mesmo que a fluorescência seja muito fraca, é fácil de identificar e possui alta sensibilidade. É usado principalmente para a pesquisa de estrutura e função celular e composição química.
Os microscópios de fluorescência são divididos em tipo de transmissão e tipo de epi-ejeção, o primeiro é mais primitivo e o último é mais avançado. A estrutura básica dos dois tipos de microscópios de fluorescência é semelhante, a principal diferença é: a luz de excitação do tipo de transmissão passa pela amostra e toda a amostra gera fluorescência, que então entra na lente objetiva. Quanto maior a ampliação, mais fraca a fluorescência; a luz de excitação do tipo epi-emissão é projetada na superfície da amostra, a superfície da amostra produz fluorescência e a fluorescência entra na lente objetiva novamente. Quanto maior a ampliação, mais forte a fluorescência, que é adequada para observação de alta ampliação. Os principais componentes do microscópio de fluorescência incluem uma fonte de luz de lâmpada de mercúrio, uma placa de filtro de excitação, um espelho dicróico (tipo de episódio), uma placa de filtro prensado e um condensador de campo escuro (tipo de transmissão), etc. geração de calor severo de lâmpadas de mercúrio, a maioria delas também são equipadas com filtros de absorção de calor. Alguns microscópios de fluorescência também possuem objetivas de contraste de fase e diafragmas anulares, de modo que as observações de contraste de fase são possíveis. Existem também microscópios fluorescentes que adotam uma estrutura invertida, outro microscópio invertido e assim por diante.
Além disso, os microscópios mencionados acima podem ser montados em um microscópio digital através da instalação de um CCD, que converte a imagem física vista pelo microscópio em uma imagem em um computador através da conversão digital para analógica. Portanto, podemos mudar a pesquisa no campo microscópico da tradicional observação binocular comum para a reprodução na tela, melhorando assim a eficiência do trabalho.
