Método de contagem direta de microscópios microbianos
Usar um hemocitômetro para contar diretamente microrganismos sob um microscópio é um método comumente usado para contagem microbiana. A vantagem deste método é a sua intuitividade e rapidez. Coloque a suspensão bacteriana adequadamente diluída (ou suspensão de esporos) na câmara de contagem entre a lâmina do hemocitômetro e a lâmina de cobertura e conte ao microscópio. Devido ao volume constante da sala de contagem (0,1 mm2), o número total de microrganismos por unidade de volume pode ser convertido com base no número de microrganismos observados ao microscópio. Devido ao fato de este método calcular a soma de células bacterianas vivas e mortas, também é conhecido como método de contagem bacteriana total.
Uma placa de contagem de células sanguíneas é geralmente uma lâmina de vidro especialmente projetada com quatro ranhuras formando três plataformas. A plataforma intermediária é dividida ao meio por uma pequena ranhura horizontal e cada lado da plataforma é gravado com uma grade. Cada grade é dividida em nove quadrados grandes, e o quadrado grande no meio é a sala de contagem, onde é realizada a contagem microbiana.
Geralmente existem duas especificações para a escala da sala de contagem. Uma é que um quadrado grande é dividido em 16 quadrados médios, e cada quadrado médio é dividido em 25 quadrados pequenos (Figura VIII -2); Outro método é dividir um quadrado grande em 25 quadrados médios, e cada quadrado médio é dividido em 16 quadrados pequenos (Figura VIII -1, C). Mas independentemente do tamanho do tabuleiro de contagem, o número de quadrados pequenos em cada quadrado grande é o mesmo, ou seja, 16 × 25=400 quadrados pequenos.
Se o comprimento lateral de cada quadrado grande for 1 mm, a área de cada quadrado grande será 1 mm2. Após a cobertura com uma lamínula, a altura entre a lâmina e a lamínula é de 0,1 mm, portanto o volume da sala de contagem é de 0,1 mm3.
Na contagem, geralmente é contado o número total de bactérias em cinco quadrados e, em seguida, é obtido o valor médio de cada quadrado. Multiplicá-lo por 16 ou 25 dá o número total de bactérias em um quadrado grande, que é então convertido no número total de bactérias em 1ml de solução bacteriana.
