Diferenças e semelhanças entre contraste de fase, microscopia de luz invertida e comum
Esses tipos de microscópios são todos microscópios ópticos, que usam a luz visível como método de detecção, o que é diferente dos microscópios eletrônicos, microscópios de tunelamento de varredura, microscópios de força atômica, etc.
Especificamente:
Microscópio de contraste de fase, também conhecido como microscópio de contraste de fase. Como a luz produzirá uma ligeira diferença de fase ao passar por uma amostra transparente, e essa diferença de fase pode ser convertida em uma mudança na amplitude ou contraste na imagem, então a diferença de fase pode ser usada para geração de imagens. Foi inventado por Fritz Zelnick na década de 1930, quando estudava redes de difração. Ele ganhou o Prêmio Nobel de Física em 1953. Atualmente é amplamente utilizado para fornecer imagens de contraste para espécimes transparentes, como células vivas e pequenos órgãos e tecidos.
Microscopia confocal: É um método de imagem óptica que usa iluminação ponto a ponto e modulação espacial pinhole para remover a luz espalhada dos planos não focais da amostra. Comparado com os métodos de imagem tradicionais, pode melhorar a resolução óptica e o contraste visual. A luz de detecção emitida por uma fonte de luz pontual é focada no objeto que está sendo observado através da lente. Se o objeto estiver exatamente no foco, a luz refletida deverá convergir de volta para a fonte de luz através da lente original. Este é o chamado confocal, ou confocal, para abreviar. O microscópio confocal adiciona um espelho dicróico ao caminho óptico da luz refletida, que refrata a luz refletida que passou pela lente em outras direções. Há um furo em seu foco. Logo no ponto focal, atrás do defletor, está um tubo fotomultiplicador (PMT). Pode-se imaginar que a luz refletida antes e depois do foco de luz de detecção passa por esse sistema confocal e não pode ser focada no pequeno orifício, sendo bloqueada pelo defletor. Então o que o fotômetro mede é a intensidade da luz refletida no foco. A importância é que um objeto translúcido pode ser escaneado tridimensionalmente movendo o sistema de lentes. Tal ideia foi proposta pelo estudioso americano Marvin Minsky em 1953. Após 30 anos de desenvolvimento, um microscópio confocal que atendeu aos ideais de Marvin Minsky foi desenvolvido usando lasers como fontes de luz.
Microscópio invertido: A composição é a mesma de um microscópio comum, exceto que a lente objetiva e o sistema de iluminação são invertidos. O primeiro está abaixo do palco e o segundo está acima do palco. Operação conveniente e instalação de outros equipamentos de aquisição de imagem relacionados.
Um microscópio óptico é um microscópio que usa lentes ópticas para produzir um efeito de ampliação de imagem. A luz incidente por um objeto é amplificada por pelo menos dois sistemas ópticos (objetivas e oculares). Primeiro, a lente objetiva produz uma imagem real ampliada, e o olho humano observa essa imagem real ampliada através da ocular, que funciona como uma lupa. Os microscópios ópticos gerais têm múltiplas objetivas intercambiáveis para que o observador possa alterar a ampliação conforme necessário. Essas lentes objetivas são geralmente colocadas em um disco giratório de lentes objetivas. Girar o disco da lente objetiva permite que diferentes oculares entrem facilmente no caminho óptico. Os físicos descobriram a lei entre ampliação e resolução, e as pessoas aprenderam que a resolução dos microscópios ópticos tem um limite. Este limite de resolução limita o aumento infinito da ampliação. 1600 vezes torna-se a ampliação dos microscópios ópticos. O limite mais elevado torna a aplicação da morfologia muito limitada em muitos campos.
A resolução de um microscópio óptico é limitada pelo comprimento de onda da luz, que geralmente não excede 0,3 mícrons. A resolução também pode ser melhorada se o microscópio usar luz ultravioleta como fonte de luz ou se o objeto for colocado em óleo. Esta plataforma tornou-se a base para a construção de outros sistemas de microscopia óptica.
