Diferença entre microscópio óptico comum e microscópio de fluorescência
Microscópio óptico: É um instrumento óptico que utiliza princípios ópticos para ampliar e criar imagens de pequenos objetos que não podem ser resolvidos pelo olho humano, para que as pessoas possam extrair informações da microestrutura.
Microscópio de fluorescência: O microscópio de fluorescência usa luz ultravioleta como fonte de luz para irradiar o objeto sob inspeção para fazê-lo emitir fluorescência e, em seguida, observar a forma e a localização do objeto sob o microscópio. A microscopia de fluorescência é usada para estudar a absorção e transporte de substâncias nas células, a distribuição e localização de substâncias químicas, etc. Algumas substâncias nas células, como a clorofila, podem apresentar fluorescência após serem irradiadas por raios ultravioleta; embora algumas substâncias em si não possam apresentar fluorescência, elas também podem apresentar fluorescência após serem coradas com corantes fluorescentes ou anticorpos fluorescentes após serem irradiadas por raios ultravioleta. A microscopia de fluorescência é uma das ferramentas para pesquisas qualitativas e quantitativas sobre tais substâncias.
Um microscópio óptico geralmente consiste em uma platina, um sistema de iluminação de holofotes, uma lente objetiva, uma ocular e um mecanismo de foco. Ao alterar o método de iluminação, o sistema de iluminação do refletor pode obter diferentes métodos de observação, como pontos de objetos escuros em um fundo claro (chamado de iluminação de campo claro) ou pontos de objetos brilhantes em um fundo escuro (chamado de iluminação de campo escuro), para melhor descobrir e observar microestruturas em diferentes situações.
Os microscópios de fluorescência diferem dos microscópios comuns das seguintes maneiras:
1. O método de iluminação geralmente é episcópico, ou seja, a fonte de luz é projetada na amostra através da lente objetiva;
2. A fonte de luz é a luz ultravioleta, o comprimento de onda é mais curto e a resolução é maior do que a dos microscópios comuns;
3. Existem dois filtros especiais, aquele na frente da fonte de luz é usado para filtrar a luz visível, e aquele entre a ocular e a lente objetiva é usado para filtrar os raios ultravioleta para proteger os olhos humanos.
O microscópio de fluorescência também é uma espécie de microscópio óptico, a principal diferença é que o comprimento de onda de excitação dos dois é diferente. Isto determina a diferença entre o microscópio de fluorescência e o microscópio óptico comum em termos de estrutura e uso.
A microscopia de fluorescência é uma ferramenta essencial na citoquímica imunofluorescente. É composto por componentes principais como fonte de luz, sistema de placa de filtro e sistema óptico. Consiste em usar um determinado comprimento de onda de luz para excitar a amostra para emitir fluorescência e observar a imagem fluorescente da amostra amplificando a lente objetiva e o sistema ocular.
