Comparação entre microscópios confocal e microscópios ópticos comuns
Um microscópio biológico regular consiste em três partes, a saber: ① sistema de iluminação, incluindo fonte de luz e condensador; ② O sistema de ampliação óptica, composto por uma lente objetiva e uma ocular, é o corpo principal de um microscópio. Para eliminar a aberração esférica e a aberração cromática, tanto a ocular quanto a lente objetiva são compostas por grupos de lentes complexos; ③ Dispositivo mecânico utilizado para fixar materiais e facilitar a observação.
A clareza das imagens do microscópio não é determinada apenas pelo fator de ampliação, mas também pela resolução do microscópio. Resolução refere-se à capacidade do microscópio (ou do olho humano a uma distância de 25 cm do alvo) de distinguir a menor distância entre objetos. A magnitude da resolução depende do comprimento de onda da luz, do índice de abertura e do índice de refração do meio. Pode ser expresso como:
R=0.61λ /N．A． N．A．＝ｎsin /2
Na fórmula: n=índice de refração do meio; =ângulo de abertura (o ângulo em que a amostra abre a abertura da lente objetiva), NA.=abertura numérica. O ângulo do espelho é sempre menor que 180? Portanto, o valor máximo de Sina/2 deve ser menor que 1.
O índice de refração do vidro usado para fazer lentes ópticas é de 1,65-1,78, e quanto mais próximo o índice de refração do meio usado estiver do vidro, melhor. Para lentes objetivas secas, o meio é o ar e a taxa de abertura é geralmente de 0,05 a 0,95; A lente de óleo usa óleo de cedro como meio e a taxa de abertura pode ser próxima de 1,5.
O comprimento de onda da luz comum é de 400 ~ 700 nm, portanto o valor de resolução de um microscópio não será inferior a 0,2 μm. A resolução do olho humano é de 0,2 mm, portanto o fator de ampliação máximo para o projeto do microscópio é geralmente 1000X.
